DiOC2(3)膜电位荧光探针

库存 ：100

英文名 ：DiOC2

CAS号 ：/

保质期 ：一年

供应商 ：上海烜雅生物科技有限公司

保存条件 ：-20

规格 ：20 mg

产  品  说  明  书 
DiOC2(3)膜电位荧光探针   
产品货号：XY4027 
产品规格：20 mg 
应用范围：膜电位染色 
 
产品参数 
外观：可溶于 DMSO 或 DMF的橘红色固体 
Ex/Em (MeOH)：482/497 nm 
CAS 号：905-96-4 
分子式：C21H21IN2O2 
分子量：460.31 
分子结构图： 
 
 
储存条件 
-20℃  避光保存，有效期见外包装。 
 
产品介绍 
DiOC2(3) (3,3′-Diethyloxacarbocyanine,  碘化物)是一种
广泛应用的膜电位探针。如用于线粒体膜电位的研究，
DiOC2(3)能够穿透真核细胞的细胞质，在浓度低于 100 nM
时，染料在具有活跃膜电位的线粒体中积累，形成红色荧光
聚集体，当使用破坏线粒体膜电位的（如 CCCP）处理细胞
时，DiOC2(3)染色强度降低。 
DiOC2(3)染色的细胞可以通过流式细胞仪的蓝色激发，
绿色和红色发射可视化。该试剂可与其他试剂搭配使用，例
如红色激发的 Annexin V–APC，用于活力和凋亡的研究。 
 
使用方法（线粒体膜电位检测） 
1. DiOC2(3) 标记细胞 
由于细胞类型、培养条件的差异以及应用方向的不同，
建议起始浓度 50 nM 摸索最佳染色条件。 
将  DiOC2(3)溶于无水 DMSO配制成 100 mM 的储液：
向管中加入 435 μL的无水 DMSO，充分溶解。每次实验前，
需将储液充分涡旋混匀。 
开始实验前，将 DiOC2(3)  和  CCCP  恢复至室温。 
（1）用预热的培养基、磷酸盐缓冲液或其他缓冲液重悬细
胞，使细胞最终密度为 1×106个/mL。 
（2）设置对照，向管中加入 1 μL CCCP 溶液至终浓度为 50 
μM，37℃孵育 5 min。 
注：CCCP 可以和 DiOC2(3)同时添加。为了获得不同细胞
类型的最佳效果，可能需要滴定  CCCP。 
（3）配置合适浓度的 DiOC2(3)工作液，加入工作液至终浓
度为 50 nM，37℃  孵育15-30 min。如果进行其他标记，如
用 Annexin V 结合物标记，请执行步骤 2.(1)；如果不需要其
他染色，请继续执行以下步骤。 
（4）（可选）清洗细胞一次，向每个细胞管中加入适量预
热的PBS 缓冲液。 
（5）1000 rpm离心 5 min 
（6）向每个管中加入 500 μL PBS 缓冲液，轻弹管壁使其重
悬。 
（7）使用 YF488 染料的发射滤光片在 488 nm激发下进行
流式分析。用 CCCP 处理的样品调节补偿。 
2. Annexin V结合物额外标记 
 可以用额外的标记方法检测  DiOC2(3)  染色后细胞的
凋亡及生存状态。如用 Annexin V–APC  标记： 
（1） 向步骤1.(3)的细胞中加入适量预热的PBS 缓冲液洗涤
细胞一次。 
（2） 1000 rpm离心 5 min，然后重悬于 100 μL 1×Annexin  结
合缓冲液中。 
（3）加入 5 μL Annexin V 结合物（如  Annexin V–APC）。 
（4）37℃孵育 15 min。 
（5）加入 400 μL Annexin  结合缓冲液。 
（6） 用适合于YF488/PI和YF633染料的发射滤光片488 nm
和 633 nm激发下进行流式分析。 
 
注意事项 
1.  荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧
光淬灭。 
2.  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅用于科研。
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