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文献和实验
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英文名 :Hep3B
供应商 :赛库(CellCook)细胞系/细胞株
相关疾病 :肝细胞癌
细胞形态 :上皮细胞样
运输方式 :常温/干冰
生长状态 :贴壁
规格 :T25
【培养条件】MEM(GIBCO CAT:11095,或同配方) 10%胎牛血清 添加剂:1X 非必需氨基酸(CELLCOOK CAT:CM1008S/L)
【推荐培养试剂】
- 基础培养基:MEM(CellCook: CM2015或Gibco cat: 11095,或同配方)
- 血清:南美级别胎牛血清(CellCook cat:CM1002L)
- 添加剂:1X 非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L)
- 配套完全培养基(CellCook cat:CC0103M)
【传代比例】
1:3传代(培养面积比)
【传代方式】
消化3分钟
【换液频率】
3-4天换液一次
【冻存液配方】
MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO
【难度等级】
+
【培养要点】
暂无
【特征特性】
HEP-3B细胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7岁黑人男童。该细胞产生甲胎蛋白(ALPHA-FETOPROTEIN)、乙肝表面抗原(BHSAG)、白蛋白、巨球蛋白、Α-抗胰蛋白酶(ALPHAL-ANTITRYPSIN)、转铁蛋白、补体(C3)、C3活性载体,纤维原等,具有广泛的研究价值。
【STR位点信息】
收到细胞后先查看细胞说明书,了解细胞类型、培养条件等基本信息,检查细胞培养基是否变色、观察T25培养瓶是否破损、漏液并在显微镜下观察细胞状态,拍照(100x、200x)以做留底。将细胞放入培养箱静置2-4h。
贴壁细胞
经物流运输,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶底脱落下来,显微镜下拍照观察可见存在部分悬浮的细胞或细胞团块。
将悬浮的细胞收集离心,使用0.25%胰酶消化后,转移至新的培养瓶中,并使用含15%血清的新鲜完全培养基培养3天;同时对原培养瓶中剩余仍然贴壁的细胞则同样更换含15%血清的新鲜完全培养基,在原瓶中培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞均未增殖且出现状态变差或脱落凋亡现象,烦请提供细胞照片反馈,我们将继续跟进。
注:以上说明针对完全培养基所含血清浓度为10%的培养条件,若培养条件为20%血清浓度,则可增加至25%血清浓度,以此类推。具体情况以细胞说明书为准。
若收到细胞时无特殊情况出现,请在显微镜下观察细胞汇合度后进行处理:
汇合度未超过80%时,使用巴氏吸管或玻璃吸管将培养瓶中的培养基吸出,同时留存6mL左右(需根据说明书记载的培养条件的血清浓度补加血清)继续培养;
汇合度超过80%时,请按照细胞培养条件进行传代培养。初次传代建议按照培养器皿底面积比1:2进行传代。
悬浮细胞
悬浮细胞经过物流运输后有可能产生细胞碎片或发生凋亡,此时请在拍照后将细胞离心收集,使用新鲜的完全培养基(可选择增加血清浓度5%)重悬并转移至新的培养皿/瓶中继续培养3天;3天后若细胞状态未有明显改善,而是停止增殖持续凋亡,烦请提供细胞照片反馈,我们将继续跟进。
若收到细胞时无特殊情况出现,请在显微镜下观察细胞状态后进行处理:
将培养瓶竖立放置1h,待细胞沉降至瓶底,使用巴氏吸管或玻璃吸管将培养瓶中的培养基吸出,同时留存6mL左右(需根据说明书记载的培养条件的血清浓度补加血清).横放培养瓶继续培养;培养至细胞数量(建议进行细胞计数)达到说明书记载的传代标准后,请按照细胞培养条件进行传代培养。
注:悬浮细胞有最适增长密度,具体请查询细胞说明书或提前咨询。
常见问题Q&A
Q:培养基到底要不要加双抗〔青霉素&链霉素,Penicillin Streptomycin) ?
A:双抗不是细胞生长所必需的。我司培养细胞时均不常规使用抗生素。同时应考虑到长期使用抗生素后可能会促使抗生素耐药的微生物产生,从而导致轻度污染持续存在。一旦停止加入抗生素,轻度污染极有可能发展成大规模污染。
请根据各自实验室的具体情况,自行决定是否使用双抗。
Q:培养过程中能更换成其它种类的培养基吗?
A:我们强烈建议使用细胞提供机构或国际权威细胞库推荐的培养条件进行培养。不排除部分细胞能够在不同培养条件下正常生长,此时建议在使用推荐培养条件做好保种或细胞维持的情况下,分离部分细胞进行测试后决定是否更改培养条件。
我司同时推出—系列经过测试的细胞完全培养基供您订购。
Q:细胞在培养过程中出现碎片如何处理?
A:贴壁细胞在移除原培养基后,用PBS液润洗2-3遍;悬浮细胞经离心移除原培养基后,加入适量PBS进行重悬,再离心去除PBS;一般建议重复上述步骤2-3遍,800-1000rpm离心3-5分钟。
Q:细胞能放在-80℃保存吗?
A:欲长期保存的细胞应使用液氢(-196℃)进行保存,短时间保存(不超过1-2周)的则可以存放在-80°℃。
Q:关于培养条件为无血清培养基的细胞如何培养?
A:培养操作基本同一般细胞,注意进行传代时需使用胰酶抑制剂终止消化,并用无血清培养基重悬细胞,切勿在任何步骤加入血清。
赛库生物(CELLCOOK)细胞目录表
货号 名称
CC0101 Hep G2(人肝癌细胞)
CC0101G Hep G2-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0101L Hep G2-LUC(示踪稳定细胞株)
CC0101N Hep G2-NTCP(示踪稳定细胞株)
CC0101R Hep G2-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0102 Huh-7(人肝癌细胞)
CC0102G Huh-7-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0102L Huh-7-LUC(示踪稳定细胞株)
CC0102R Huh-7-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0103 Hep3B(人肝癌细胞)
CC0103R Hep3B-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0105 SNU-449(人肝癌细胞)
CC0105R SNU-449-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0106 SK-HEP-1(人肝腹水腺癌细胞)
CC0106G SK-HEP-1-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0106R SK-HEP-1-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0107 SNU-398(人肝癌细胞)
CC0108 MHCC-LM3(人高转移潜能肝癌细胞)
CC0108G MHCC-LM3-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0108L MHCC-LM3-LUC(示踪稳定细胞株)
CC0108R MHCC-LM3-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0109 MHCC97-L(人低转移潜能肝癌细胞)
CC0109G MHCC97-L-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0109R MHCC97-L-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0110 MHCC97-H(人高转移潜能肝癌细胞)
CC0110R MHCC97-H-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0111 PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞)
CC0112 SNU-387(人多形性肝癌细胞)
CC0113 SNU-182(人肝癌细胞)
CC0114 Huh-6(人肝母细胞瘤细胞)
CC0115 SNU-423(人肝癌细胞)
CC0116 Li-7(人肝癌细胞)
CC0117 HCCC-9810(人胆管细胞型肝癌细胞)
CC0118 HepG2.2.15(表达HBV病毒的人肝癌细胞)
CC0120 RBE(人胆管细胞型肝癌细胞)
CC0121 HUCC-T1(人胆管上皮癌细胞)
CC0201 NCI-H292(人肺粘液上皮样癌细胞)
CC0202 A549(人非小细胞肺癌细胞)
CC0202G A549-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0202L A549-LUC(示踪稳定细胞株)
CC0202R A549-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0203 NCI-H1299(人非小细胞肺癌细胞)
CC0203G NCI-H1299-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0203R NCI-H1299-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0204 PC9(人非小细胞肺癌细胞)
CC0204G PC9-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0204R PC9-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0205 NCI-H358(人非小细胞肺癌细胞)
CC0206 NCI-H1975(人非小细胞肺腺癌细胞)
CC0206L NCI-H1975-LUC(示踪稳定细胞株)
CC0208 NCI-H1573(人非小细胞肺腺癌细胞)
CC0209 NCI-H446(人小细胞肺癌细胞)
CC0209G NCI-H446-GFP(示踪稳定细胞株)
CC0209R NCI-H446-RFP(示踪稳定细胞株)
CC0210 NCI-H460(人大细胞肺癌细胞)
CC0211 NCI-H1650(人肺支气管癌细胞)
CC0212 NCI-H520(人肺鳞癌细胞)
CC0213 Calu-3(人肺腺癌细胞)
CC0214 Calu-1(人肺癌细胞)
CC0215 HCC827(人非小细胞肺癌细胞)
CC0216 NCI-H661(人大细胞肺癌细胞)
CC0217 SK-MES-1(人肺鳞癌细胞)
CC0218 NCI-H1395(人肺腺癌细胞)
CC0219 NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞)
CC0220 HCC4006(人肺癌腺癌细胞)
CC0221 NCI-H209(人小细胞肺癌细胞)
CC0222 NCI-H524(人小细胞肺癌细胞)
CC0223 NCI-H1437(人肺癌细胞)
CC0224 NCI-H838(人肺癌细胞)
CC0225 Calu-6(人退行性肺癌细胞)
CC0226 NCI-H1666(人肺支气管癌细胞)
CC0227 DMS 153(人小细胞肺癌细胞)
CC0228 NCI-H69(人小细胞肺癌细胞)
CC0229 NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)
CC0230 NCI-H1703(人肺鳞癌细胞)
CC0231 NCI-H2009(人肺腺癌细胞)
CC0232 NCI-H2087(人非小细胞肺腺癌细胞)
CC0233 NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)
CC0235 PLA-801D(95D)(人高转移肺腺癌细胞)
CC0236 NCI-H441(人肺腺癌细胞)
CC0237 DMS 114(人小细胞肺癌细胞)
CC0238 SK-Lu-1(人低分化肺腺癌细胞)
CC0239 NCI-H526(人肺癌转移)
CC0240 NCI-H2122(人肺腺癌细胞)
CC0241 DMS 53(人小细胞肺癌细胞)
CC0242 NCI-H2030(人非小细胞肺癌细胞)
CC0243 NCI-H3122(人肺腺癌细胞)
CC0244 NCI-H2228(人非小细胞肺癌细胞)
CC0245 NCI-H1944(人非小细胞肺癌细胞)
CC0246 NCI-H2126(人非小细胞肺癌细胞)
CC0247 NCI-H2347(人非小细胞肺癌细胞)
CC0248 NCI-H1688(人小细胞肺癌细胞)
CC0249 NCI-H522(人肺腺癌细胞)
CC0250 A427(人肺腺癌细胞)
CC0252 NCI-H196(人小细胞肺癌细胞(胸腔积液))
CC0253 NCI-H146(人小细胞肺癌细胞(骨髓转移))
CC0254 NCI-H1568(人非小细胞肺癌细胞(淋巴结))
CC0256 SW1271(人小细胞肺癌细胞)
CC0257 SHP-77(人肺癌细胞)
CC0258 NCI-H82(人小细胞肺癌细胞)
CC0301 MDA-MB-240(人乳腺癌细胞)
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