文献支持Exosupur®细胞上清、尿液等简单样本外泌体分离试剂盒

库存 ：充足

英文名 ：Exosupur® small extracellular vesicles purification kit

保质期 ：一年

供应商 ：北京恩泽康泰生物科技有限公司

保存条件 ：2-8℃保存

规格 ：1mL*1pcs/1ml*4pcs/3ml*3pcs/10ml*1pcs

 一、产品介绍：

本试剂盒是专门用于从细胞上清、尿液等非复杂样本中提取小细胞外囊泡sEV的纯化试剂盒。试剂盒采用分子排阻色谱的原理，根据被分离样本中组分的分子尺寸大小实现外泌体的分离。本试剂盒具有快速、高效、操作简单、对设备要求低等特点，可在30min内完成外泌体的分离纯化。提取的外泌体产物质量稳定可靠、蛋白污染程度低，可用于蛋白提取分析、RNA提取分析、细胞功能检测等下游生物学实验。

针对中小体积到大体积细胞上清等成分简单生物样本sEV分离提供系统性解决方案。

二、产品规格：

• Exosupur^®sEV分离kit-10ml排阻柱

规格：ES910【10ml*1pcs】

1）单次上样10ml*5次重复=50ml

应用：适用于细胞上清、尿液等非复杂的大体积样本。搭配Exosupur^® ES8500细胞上清高倍浓缩试剂盒使用，总处理量高达1.5L-2.5L

• Exosupur^®sEV分离kit-1ml排阻柱

规格：ES911 & ES914

1）ES911【1ml*1pcs】，单次上样1ml*5次重复=5ml

2）ES914【1ml*4pcs】，单次上样1ml*4根*5次=20ml

应用：适用于非复杂细胞上清、尿液等浓缩后的小体积样本sEV纯化（5-20ml）

• Exosupur^®sEV分离kit-3ml排阻柱

规格：ES933

1）ES933【3ml*3pcs】，单次上样3ml*3根*5次重复=45ml

应用：适用于非复杂细胞上清、尿液等浓缩后的45ml以内样本sEV纯化

三、产品概述：

关于外泌体纯化方法，国际细胞外囊泡协会（ISEV）的最小实验要求（MISEV2023）中根据不同的原理进行外泌体分离时，每种方法均有优缺点：

分子尺寸排阻色谱法SEC在诸多分离方法中一骑绝尘，因其优良的性能脱颖而出，获得广大EVs领域专家的青睐，在EVs专刊JEV中的研究占比日益提高。

恩泽康泰开发的基于SEC原理的外泌体分离纯化专利产品——Exosupur^®试剂盒，自推出以来经受了市场和EVs领域专家的检验，在操作简便性、性能、稳定性和性价比上获得一致好评。

四、产品应用：

1、可兼容细胞上清、尿液等不同样本类型；

2、可用于不同样本的高通量测序、质谱等组学研究，以及下游的PCR、WB、WLISA验证等，纯度更高，杂质干扰更少，定量更准确；

3、可用于细胞、动物的功能机制研究，不影响外泌体性质和活性、不引入聚集和其他杂质等影响；

4、可用于工程化外泌体改造后再次纯化等研究；

5、可用于纯化相关的方法学开发中作为对照方法使用。

五、产品优势：

1、操作简便：无需特殊设备，柱平衡、上样、外泌体收集、外泌体浓缩四步操作，从上样到分离仅需30min。升级后的产品配套柱平衡或清洗的适配器，让操作更简便，解放双手；

2、性能优越：对于大体积的细胞上清样本可回收最高达95%，平均90%的荧光脂质体，杂蛋白去除率99%以上；

3、稳定性高：只回收固定尺寸范围的外泌体，产物粒径范围窄；实验受外界因素波动的影响比较小；不引入其他的物理化学因素，可以保持完整的外泌体形态和功能；

4、性价比高：可对排阻柱进行清洗再生，重复5次使用，可处理的样本量大；

5、质量可靠：高效便捷辅助客户发文70篇+，经受了行业专家的检验，获得北京市新技术新产品认定。

六、性能数据

Exosupur^®分离的细胞上清外泌体TEM、WB和NTA表征。

针对中小体积的细胞上清样本，Exosupur^®最高可回收95%的荧光外泌体，平均90%，杂蛋白去除率99%以上。下左图为1ml排阻柱(ES914/ES911)分离1mL浓缩的细胞上清的效果，下右图为3ml排阻柱ES933分离3mL浓缩的细胞上清的效果。下面第二排图片为10ml排阻柱(ES910)上样浓缩的10ml细胞上清的效果。

Protein K和RNase A双酶消化进一步证实了Exosupur^®得到的RNA更多的是来源于囊泡，而囊泡外的游离RNA检测值更低，有利于RNA组学。

Exosupur^®分离的外泌体进行蛋白质组研究时，可检测到丰富的囊泡特异的标志物蛋白，表明外泌体纯度高，可以更多检测外泌体来源的蛋白；可检测到比较多的蛋白数量，有利于不同样本之间的差异分析；与已发表文章、数据库具有较多overlap，表明数据可靠，能够准确的对外泌体蛋白进行研究。

对比不同的SEC分离方法：经过Exosupur^®试剂盒收集的馏分，具有最高的荧光强度（A)和最低的蛋白质浓度（B和C），表明Exosupur^®具有最有效的EVs回收率和最低的游离蛋白质污染。

七、常见问题

Q : Exosupur^®外泌体纯化试剂盒能不能配套类似塑料试管架子，方便使用？

A : 我们有配套的排阻柱支架（ES914S和ES933S），需要单独购买。

 

Q : Exosupur^®外泌体纯化试剂盒每次多倍柱体积PBS或清洗液冲洗，能不能配套有个缓冲器，不用反复添加？

A : 我们有配套的适配器（ES914A和EchoES933A），需要单独购买。

 

Q : 适配器跟排阻柱无法严丝合缝，存在漏液？

A : 调整一下适配器的方向，适配器插的稍微紧一点，正常现象不影响使用。

 

Q：该试剂盒分离外泌体需要自备的内容有哪些？

A：1）无菌PBS溶液(须用0.22μm滤膜过滤，建议新鲜配置或采购已过膜的PBS，4°C冰箱保存的PBS溶液需先平衡至室温)；

2）20%无水乙醇(须超声条件脱气20min或配置好后静置过夜)；

3）超滤管(截留分子量100kD)；

4）收集管(1.5mL EP管和15mL离心管)；

5）样品(上样前需平衡到室温)。

 

Q：样本收集完了，颜色还在中间，是否有问题？

A：按照操作说明来做，就没问题，一般是颜色滞后，因为颜色都是小分子成分，会靠后出来，外泌体会先流出，故不能以颜色作为外泌体收集的判断。

 

Q：用完了是直接用封闭液冲洗，还是2倍柱体积PBS冲了再用1倍柱体积封闭液冲？

A：如果本次接着用就不用封闭液清洗；如果本次不用了，需保存起来下次用，那么本次就用PBS冲洗后再封闭液冲洗。

 

Q：分离后的外泌体如何保存？
A：外泌体保存问题跟分离方法无关，是由其本身特性决定的，如果条件允许最好使用新鲜的外泌体进行实验，冻存的外泌体容易产生团聚并出现沉淀。实际研究中，外泌体功能实验往往需要大量的外泌体不得不分批提取保存时可-80℃保存；但做biomarker研究时，如RNA组学等，提取外泌体后需尽快完成RNA提取等后续实验。