Calcein AM 细胞活力检测试剂盒

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保质期 ：一年

供应商 ：上海烜雅生物科技有限公司

保存条件 ：-20

规格 ：200T/1000T

产 品 说 明 书
Calcein AM细胞活力检测试剂盒
产品货号：XY6003S, XY6003L
产品内容：
组分 XY6003S（200T） XY6003L（1000T）
2 mM Calcein AM（无水 DMSO） 100 μL 500 μL
应用范围：活细胞荧光示踪探针
产品参数
Ex/Em：494/517 nm (pH 8)
储存条件
本产品-20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
Calcein , AM是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色
试剂，它可以穿透细胞膜进入细胞，被细胞内的酯酶剪切
Calcein。Calcein 带高度负电荷，被滞留在正常细胞的胞质
内，发出明亮的绿色荧光。由于其低毒性，Calcein , AM 可
以用于研究细胞膜的完整性和长期细胞示踪实验。此外，它
也可被用于定量活细胞数。Calcein AM 细胞活力检测试剂
盒是在细胞活力检测中，用来定量活细胞数的终点检测法。
测定所产生的荧光信号与样品中的活细胞数成正比（图1） 。
图 1. 用 Calcein AM Cell ViabilityAssay Kit 定量 HeLa 细胞
数。细胞在检测前 24 h接种于 96孔板内。
使用方法
1. Calcein , AM 工作液的配置
（1）从冷冻状态下取出 Calcein , AM 储存液原管，静置30
min 使其恢复至室温。
（2） 在10 mL 的 PBS中加入 10 μL 的 2 mM Calcein, AM 储
存液，涡旋混匀，配置成 2 μM 的Calcein, AM 工作液。
注：Calcein, AM 工作液的推荐浓度为 0.1-10 μM，最佳
使用浓度由具体细胞类型决定。2 μM 的 Calcein, AM 工作
液适用于以下类型的细胞：NIH3T3, PtK2, HeLa 和 MDCK。
2. 细胞活力检测
（1）按实验要求将细胞接种于 96孔培养板，推荐使用黑色
板壁的培养板用于荧光检测。对于贴壁细胞，需在检测前一
天铺板，并设定空白对照孔。
（2）根据实验要求对细胞进行适当处理。
（3）吸除每孔培养液。注：培养基中的血清可能含有酯酶
活性，会增强背景荧光。因而这一步操作中，可用 PBS 清
洗细胞，以降低残留血清的影响。
（4）每孔加入100 μL的 2 μM Calcein, AM 工作液。
（5）37℃孵育 30 min或者更长时间。
（6）用激发波长为 485 nm，发射波长为 530 nm的荧光检
测仪测量培养板内的荧光。
注意事项
1. Calcein , AM 遇到湿气会分解，使用后请在-20℃下密闭
冷冻保存，防止水分进入。
本产品仅用于科研。
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