稳定细胞株构建

稳定细胞株构建是指将外源DNA克隆到具有某种抗性或者选择基因的载体上，转染宿主细胞后，利用载体中所含的选择标志进行筛选，得到可稳定表达目的蛋白的细胞株。泓迅科技提供一系列稳定细胞株构建服务，用于全长抗体及抗体片段、Fc融合蛋白、多种细胞表面受体、胞质和分泌蛋白等重组蛋白/抗体的稳定及规模化生产。

图1 稳定细胞株构建实验流程

• 外源基因严格鉴定，细胞无污染
• CHO1.0稳转载体，配合嘌呤霉素+MTX筛选系统
• 稳定转染及Pool筛选，周期8周左右
• 可对重组蛋白/抗体全长或片段进行个性化表达

服务项目	服务详情	转染方式	系统	项目周期	验证方式	交付项目
常规过表达稳转细胞株构建	稳定转染及pool筛选	质粒转染 慢病毒转染	293T、Hela、A549等	2-3周	Western Blot、免疫荧光（IF）验证	稳转细胞株pool
	稳定转染及单克隆筛选，筛选至少20个单克隆细胞株			5-6周		1-3株稳转细胞株 表达报告
抗体稳转株构建	稳定转染及pool筛选	质粒转染	CHO1.0	8周		稳转细胞株pool

泓迅科技将GFP序列构建到CHO 1.0载体上，然后将构建好的GFP质粒转化到CHO细胞中进行稳定转染及Pool筛选，获得GFP-CHO稳转株，经过多轮药物筛选后，显微镜下观察荧光细胞所占比例大于90%（图2）。 图2 GFP-CHO稳转株阳性率