CRISPR sgRNA载体构建

CRISPR-Cas9技术是目前大热的基因编辑技术，它利用短RNA(gRNA)来引导核酸酶(Cas9)到达DNA靶点。该技术使用简单而且扩展性强，已被广泛应用于实验室研究、生物医学研究、动植物基因工程等领域。包括建立各种遗传修饰的模式生物模型、建立基因调控（如敲除、插入、抑制、激活）细胞系、动植物育种、遗传疾病修复、癌症等重大疾病治疗以及相关药物靶点筛选等。 泓迅科技提供sgRNA质粒构建服务，针对不同物种（动物、植物等）提供多种质粒构建方案，匹配实验所用材料，提高质粒构建的成功率，为您提供快速、优质的sgRNA载体构建服务。

• 全模式物种sgRNA设计：可完成几十种动物、植物和微生物的sgRNA设计服务；
• 丰富的质粒结构：可提供多种物种经过验证的质粒结构，满足您的实验需求；
• 成功率高：针对不同基因设计多个靶点，提高质粒构建的成功率；
• 质粒验证服务：构建质粒的同时，也可提供sgRNA活性验证服务，检测sgRNA活性，提高实验成功率。

步骤	服务内容
明确物种和载体	不同物种不同载体
设计靶点	一般在不同转录产物的共同外显子上设计3-5个靶点，尽可能破坏重要的domain和所有转录产物isoform。
合成	合成前确认检测靶点是否存在SNP（如果存在SNP，则不能用T7E1酶检测是否存在突变）
靶点切割活性检测	293T细胞内检测SSA活性	酶体外切割活性验证（推荐）
内源活性验证       （有条件选择）	若目的细胞转染率高，如293T细胞，可转染72h后提基因组，扩增靶序列，T7E1酶切验证，进一步测序验证。