血清外泌体纯化试剂盒（磁珠型）

库存 ：999999

英文名 ：Omiget

CAS号 ：AE02-01

保质期 ：12个月

供应商 ：奥秘佳得

保存条件 ：4℃

规格 ：10T

特点与优势。
1. 本试剂纯化效率高，外泌体回收率达到 95%以上。
2. 本试剂盒纯化的外泌体纯度高，杂蛋白含量在 5%以内。
3. 本试剂盒操作简单，能够快速（2 h）完成外泌体纯化。
4. 本试剂盒操作温和，纯化时间短，纯化的外泌体完整性好。
1. 本产品主要用于血清、血浆及其它外泌体含量丰富的样品中的外泌体纯化。
2. 样品准备。血清等样品转入离心管，3000 g，4 ℃离心 5 min，弃沉淀，上清转移至新的离心管 中，用于外泌体纯化。
3. 磁珠准备。取出试剂盒中的瓶装磁珠，震荡混匀（Vortex）30 sec，利用移液器吸取 0.6 ml 磁珠， 加入 15 ml 离心管中，3000 g，4 ℃离心 2 min，弃上清。 4. 磁珠洗涤。加入 10 ml，4 ℃预冷的 PBS，震荡混匀（Vortex）30 sec，3000 g，4 ℃离心 5 min， 弃上清。
5. 外泌体纯化体系。外泌体纯化体系为 6 ml，可以纯化 4 ml 左右的血清样本，各组份如下表。
6. 外泌体纯化体系配制。根据外泌体纯化体系表，配制外泌体纯化体系，若样品体积不足 4.14 ml， 可以用 ddH2O 补齐体积。也可以按照比例减少各试剂的用量（请勿随意更改各试剂比例，易 导致外泌体纯化失败），构建小体系外泌体纯化系统。
7. 孵育。外泌体纯化体系配制完成后，置于旋转混合器中，4 ℃旋转混合 60 min。
8. 磁珠收集。孵育完毕将离心管转入离心机，3000 g，4 ℃离心 5 min，沉淀磁珠，弃上清；或将 离心管置于磁力架上，4 ℃静置 5-10 min，使磁珠聚集，弃上清。
9. 残余液体去除。将装有磁珠沉淀的离心管转入离心机，3000 g，4 ℃离心 1 min，用移液器吸尽 管中残余液体。
10. 外泌体洗脱。加入 0.8-1.5 ml Buffer EXE（PBS 或 ddH2O），剧烈振荡（Vortex）30 sec。
11. 外泌体收集。7000 g，4 ℃离心 2 min，将离心管置于磁力架上（可以有效聚集磁珠，防止磁珠 散落在溶液中，降低外泌体纯度），转移上清至新的 EP 管中，即为纯化的外泌体溶液。
12. 过滤。利用 PBS 润洗针式过滤器 A 和 B（即用这两种滤器过滤 5 ml PBS），并利用针式过滤 器 A 过滤外泌体溶液，除去体积较大杂质。滤液再用针式过滤器 B 过滤，除去体积较小的杂 质，得到高纯度的外泌体溶液。
13. 纯化的外泌体溶液可立即用于粒径检测（NTA 分析），或保存在-80 ℃