5×DNA退火缓冲液

库存 ：50

英文名 ：5×DNA Annealing buffer

保质期 ：1年

供应商 ：上海博尔森生物科技有限公司

保存条件 ：-20℃

规格 ：1mL /5mL

5×DNA退火缓冲液

 

保存：-20℃保存，保质期 1 年。

产品内容：

产品说明：

5×DNA 退火缓冲液不仅可以用于常规的 DNA oligo 的退火，而且特别适合于较难退火的用于 RNAi (也称 siRNA)质粒构建的 DNA oligo 的退火。用于 RNAi 质粒构建的 DNA oligo 通常由于含有约 20 个左右的互补序列，极易自身形 成发夹结构，从而影响两条 DNA oligo 的正确退火。

5×DNA 退火缓冲液可以有效避免 DNA oligo 自身形成发夹结构，并且两条 oligo 退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。

操作说明：

1. 把待退火的 DNA oligo 用经灭菌的 Milli-Q 水或重蒸水配制成 50µM。溶解 5×DNA 退火缓冲液，混匀备用。

2. 如下设置退火反应体系：

按照上述顺序依次加入各种试剂，混匀。如果所用的 PCR 仪没有热盖，滴加矿物油(mineral oil)以防止蒸发。

3. 如下设置 PCR 仪进行退火反应：

注 1：如果所用的 PCR 仪不具备下降 0.1ºC 的功能，也可以设置为每 90 秒下降 1ºC。

4. 退火结束后可以直接用于连接反应，也可以-20ºC 冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应，最好用纯化试剂盒 进行纯化，或者确保退火产物在反应体系中体积不超过 5%，以避免 Annealing Buffer对后续的酶反应体系的干扰。

注意事项：

1．使用本试剂盒操作非常简单，只需把待退火的 DNA oligo 和 Annealing Buffer for DNA Oligos (5X)按照一定比例混合后，置于 PCR 仪上，约 90 分钟即可完成。

2．如果一次退火反应体积为 100 微升，一个包装的退火缓冲液可以进行 50 次退火反应。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！