植物基因组DNA快速提取试剂盒

库存 ：50

英文名 ：Plant gDNA Extract Kit

保质期 ：1年

供应商 ：上海博尔森生物科技有限公司

保存条件 ：常温

规格 ：50T

植物基因组DNA快速提取试剂盒

储存条件：常温保存，保质期 1 年，溶菌酶-20℃保存。

产品内容：

产品介绍：

植物基因组 DNA 快速提取试剂盒不含巯基乙醇等刺激性试剂，对于人体无害。

适用范围广，可以使用于绝大多数植物的各种组织。

提取的 DNA OD260/280 一般在 1.8 以上，纯度高，不含污染和抑制剂，可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsatellite analysis 等各种后续分子生物学实验。

注意事项：

1. 裂解液 I 和纯化液 II 容易产生沉淀，纯化液 II 比较粘稠，用前均需要放置在 65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。

2. 自备试剂：氯仿。

（一）样品裂解：

1. 液氮研磨

a. 称取植物组织 0.1-0.5 g 左右，剪成微小的碎片，于液氮研磨后将粉末转移至 1.5 mL 的离心管中。

b. 在上述离心管中加入 0.75 mL 的经过 65℃预热的裂解液 I。

2. 匀浆机匀浆

a. 65℃预热裂解液 I，待其沉淀溶解后，充分混匀，取 0.75 mL 加入到 10 mL 塑料离心管中并放置于 65℃待用。

b. 称取植物组织 0.1-0.5 g 左右，剪成微小的碎片，加入到有裂解液 I 的 10 mL 塑料离心管中并短暂匀浆。( 裂解液 I 含去垢剂，匀浆会产生大量泡沫)

c. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的 1.5 mL 塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠，可将枪头剪去一截后转移上清, 不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。

（二）样品纯化：

1. 在步骤（一）所得的裂解产物中加入 0.5 倍体积预热的纯化液 II，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。（由于纯化液 II 比较粘稠，可以将 1 mL 枪头剪去一截再吸取）。

2. 65℃水浴 3-5 分钟。如果室温放置，DNA 产量会降低 10-20%。

3. 加入 200 uL 自备氯仿，震荡混匀 10-30 秒。

4. 12,000 rpm 室温离心 2 分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的 1.5mL 塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。

（三）基因组 DNA 收集：

1. 在步骤（二）所得的上清中加入 1.5 倍体积的结合液 III，颠倒数次混匀后，分多次上同一 DNA 吸附柱，每次上柱后均先室温放置 2 min，然后 12,000 rpm 离心 1 min，倒掉穿透液。

2. 在吸附柱中加入 500 μL 洗涤液，12,000 rpm 离心 1 min，弃穿透液。

3. 再将吸附柱 12,000 rpm 离心 30 s 以甩干乙醇。

4. 将吸附柱放入一个干净的 1.5 mL 离心管中。在吸附柱中央加入 50 μL 洗脱液（65-70℃预热），室温静置 5 min。12,000 rpm 离心 2 min。将穿透液重新加入吸附柱中央，12,000 rpm 离心 1 min 以洗脱更多基因组 DNA。

5. 检测 DNA 质量。将所得的基因组 DNA 保存于-20ºC 冰箱。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！