琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

库存 ：50

英文名 ：Agarose gel DNA Recovery Kit

保质期 ：1年

供应商 ：上海博尔森生物科技有限公司

保存条件 ：室温

规格 ：100T

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

保存温度：室温，可保存 1 年。

产品内容

产品说明：

本试剂盒适用于从琼脂糖凝胶电泳中回收 100bp-50kb 大小 DNA 片段。其原理是利用溶胶液融化凝胶，然后使用特殊材质制成的吸附柱高效特异的吸附 DNA 片段，再用 TE Buffer 或灭菌去离子水洗脱 DNA 片段。一般可在 30 分钟内完成操作。本试剂盒的吸附柱的最大吸附量可达 40 µg ，DNA 回收效率高达 85%以上；电泳凝胶不必使用低熔点的琼脂糖；回收的 DNA 片段纯度较高，可直接用后续的各种酶促反应、DNA 连接、DNA 测序等。

操作步骤：

1. 将琼脂糖凝胶电泳后的单一目的片段切出，放入 1.5 ml 灭菌离心管中，加入约 3 倍凝胶量的溶胶液（体积比，0.1 g 凝胶视为 100 µl），65℃加热 5-10 分钟使胶块完全融化。

2. 所得液体（降至室温）加入吸附柱中，室温静置 2 分钟（特别重要），12,000 转/分 离心 30 秒，弃去离心管中液体。

3. 向吸附柱中加入 500-600 µl 洗涤液，12,000 转/分 离心 30 秒，弃去离心管中液体。重复此步骤一次。

4. 再于 12,000 转/分 离心 3-5 分钟，或置于 50℃烘箱彻底烘干。将吸附柱转移至 1.5 ml 离心管中。

5. 加入预热 65℃-100℃ TE Buffer 或灭菌去离子水（pH 值 7.5-8.0）30-50 µl 静置 2 分钟，12,000 转/分 离心 2 分钟，离心管内的液体即含有目的 DNA 片段。

使用中注意事项：

1. 切胶时尽量减小胶块的体积，胶块过大会影响 DNA 片段回收的效率；切碎胶块有利于凝胶的融化。

2. 胶块完全溶解所需时间因凝胶的浓度、大小不同而不等，凝胶浓度大于 2%，适当增加溶胶液的量。

3. 步骤 4 务必保证彻底清除吸附柱中的残液。

4. 步骤 5 根据回收产物的量，建议适当多加 TE Buffer 或灭菌去离子水；保证去离子水 pH 值 7.5-8.0。

5. 为提高回收量，可将步骤 5 离心所得的溶液重新加入吸附柱中，静置 2 分钟，再次离心 2 分钟。

6. DNA 产物应保存在-20℃，以防降解。

DNA 浓度及纯度检测：

可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度和纯度。DNA 在 OD260处有显著吸收峰，OD260 值为1 相当于 50µg/ml 双链 DNA，40µg/ml 单链 DNA。OD260 /OD280 比值应为 1.7-1.9，如用去离子水洗脱，比值会偏低，但不表示纯度低。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！