Dxy_ PIERCE MAGNETIC RNA PULL-DOWN KIT, 20 RXNS

Dxy_ PIERCE MAGNETIC RNA PULL-DOWN KIT, 20 RXNS

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品牌:Thermo Scientific

货号:20164

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Thermo Scientific Pierce 磁性 RNA-蛋白沉降试剂盒为研究人员提供了一种简化、稳健的方法,使用末端标记 RNA 作为诱饵来富集蛋白-RNA 相互作用。

磁性 RNA-蛋白沉降试剂盒的特征:

直接 – 使用末端标记 RNA 直接捕获核糖核蛋白复合物;沉降时不使用或不需要抗体
易于使用– 富集 RBP 时不需要使用离心杯或离心;简化了程序,完成 RNA 标记反应后仅需极少的手动操作时间(小于 3 小时)
灵活– 使用体外转录 RNA 或合成 RNA 标记各种长度和复杂性;使用内源性、过表达和体外翻译裂解物成功富集的蛋白
特异性– 磁珠背景噪音低;无关 RNA 或突变 RNA 不会显著影响特定 RBP 的富集
经济– 价格低于单独购买商业合成的末端标记 RNA、磁珠和试剂
全套– 含有标记模块和富集模块,模块中带有检测所需的缓冲液;包括阳性对照 RNA、阴性对照 RNA 以及 RBP 抗体

磁性 RNA-蛋白沉降试剂盒提供了使用以脱硫生物素末端标记的 RNA 高效富集 RNA 结合蛋白 (RBP) 的试剂以及链霉素亲和素磁珠。全套试剂盒中包含的试剂足够进行 20 次 RNA 标记反应和 20 次蛋白-RNA 沉降分析。这种直接富集蛋白-RNA 交互体的方法可以替代蛋白-RNA 复合体或核酸嵌入蛋白的抗体捕获法。本试剂盒的另一个优点是,它为标记反应和 pull-down 分析均提供了经验证的质控品。该试剂盒适于进行多种下游应用,包括 Western 印迹和质谱 (MS)。

包括:
全套试剂盒中包含 Pierce RNA 3'-端脱硫生物素化试剂盒、阳性和阴性 RNA 对照品、核酸兼容性链霉素亲和素磁珠以及 RBP 富集和洗脱缓冲液

需要:
用户提供的 RNA 和裂解物(实验样品)

应用:
• 突变分析
• 结构功能分析
• RNA 与蛋白相互作用的鉴别
• 未知 RNA 与蛋白结合对或复合物的 MS 分析

使用标记 RNA 作为诱饵来富集 RNA-结合蛋白优于抗体富集,因为其直接捕获相互作用。本试剂盒中包括 Pierce RNA 3'-末端脱硫生物素化试剂盒,其使用 T4 RNA 连接酶将单个胞苷二磷酸核苷酸连接至单链 RNA 的 3'-末端。脱硫生物素既可用作检测靶标,也可用作可洗脱亲和柄。核苷酸与脱硫生物素之间的间隔臂长度已经过优化处理,可高效连接至微珠上,而不会阻碍 RNA 与蛋白的结合。

RNA 结合蛋白富集的程序已经过优化,易于使用。先将标记好的 RNA 捕获到微珠上,以作好结合蛋白的准备。将结合了 RNA 的微珠放入蛋白 RNA 结合缓冲液中进行平衡,然后加入蛋白裂解物。洗涤后,可使用非变性生物素洗脱缓冲液或 SDS-PAGE 上样缓冲液洗脱样品。

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