1M山梨醇溶液/酵母电转感受态细胞制备液（过滤除菌）

库存 ：50

英文名 ：1M Sorbitol Solution

保质期 ：1 年

供应商 ：上海博尔森生物科技有限公司

保存条件 ：4℃

规格 ：100mL

1M山梨醇溶液/酵母电转感受态细胞制备液（过滤除菌）

储存条件：4℃保存，有效期 1 年。

产品内容：

产品说明：

1M 的山梨醇一般用于酿酒酵母或者裂殖酵母电转感受态的制备。

酵母感受态细胞的制备：

1. 活化菌种。-80℃保存的菌种在固体 YPDA 培养基（YPDA 加 20g Agar/L）上划线，在 30℃培养 2-4 天。

2. 挑取酵母单菌落在固体 YPDA 培养基上划 3-5 mm 的短线，在 30 ℃培养 2-4 天。待酵母单菌落长至 2 mm长时，接种。

3. 首先把酵母细胞接种到 50 ml 液体 YPDA 培养基的三角瓶中继续培养，待 OD600 到 1.3-1.5 范围内。

4. 将酵母菌置于冰上放置 10 min 后，收集细胞。1000 g，离心 5 min, 去上清。

5. 沉淀用 30-50 ml 的预冷的无菌水悬浮。1000 g，离心 5 min，去上清。重复洗涤 2 次。

6. 沉淀用 5mL 冰上预冷的 1M 山梨醇溶液重悬。1000 g，离心 5 min，去上清。

7. 沉淀用 0.4 mL 的预冷的 1M 山梨醇溶液重悬，按照 40 uL 分装。

酵母转化：

1. 在 40uL 的酵母感受态细胞中，加入 5uL（100ng）的质粒，混匀。

2. 转移到预冷的电转槽中，电击。

3. 在电转槽中加入 500uL 预冷的 1M 山梨醇溶液，轻柔混匀。

4. 涂布于相应的筛选培养基上，28-30℃培养 3-5 天。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！