流式通用试剂

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流式试剂-同型对照
流式细胞中检测稀有细胞群体或多色染色的时候,会遇到非特异性染色或背景的问题。同种型对照是针对所分析细胞类型上不存在的抗原而产生的抗体,专门开发用于确定背景表面染色水平。

图1:J774巨噬细胞在含有CD11b FITC (MCA74F)和IgG2b Alexa Fluor®647 (MCA6006A647)的PBS w/v1%BSA中,4℃染色30分钟。a)在没有Fc或 b) 有小鼠Seroblock FCR(BUF041A)及c) 有小鼠Seroblock FCR(BUF041A)同时进行F4/80 A647 (MCA497A647) 特异性染色。a图中圆圈圈出的A647阳性细胞是Fc结合,在Fc被封闭后就消失了。从而可以确保c图中的特异性染色的准确性。所有的数据均基于7-AAD染色阴性的圈门分析,已经进行了去粘连体和去死细胞的圈门。

流式通用试剂
缓冲液: 我们有一系列缓冲液适用于流式细胞术和其他应用的细胞表面和细胞内抗体染色。
  • Leucoperm – 用于细胞内染色的细胞破膜试剂
Leucoperm试剂使您的胞内抗原分析与表面抗原分析一样简单,Leucoperm可允许您固定和破膜的细胞仍旧保持其原有形态。适合比如细胞质、核酶、癌蛋白、细胞因子等结构的抗体染色。
  • 染色缓冲液——含有小牛血清的染色缓冲液
我们的染色缓冲液经过优化,可用于对活细胞和固定细胞进行染色。适用于偶联抗体和非偶联抗体,可用作抗体稀释和洗涤缓冲液。
  • 固定缓冲液——对于破膜前的胞内染色至关重要,适用于大多数细胞类型。
  • ICS perm洗涤缓冲液 (10x) – 用于细胞内染色的破膜和洗涤缓冲液
对于胞内靶点如细胞因子和胞质蛋白的染色需要在固定进行破膜处理。我们的破膜缓冲液对细胞形态的影响最小,并以10x 溶液的形式提供。它还可以在细胞内染色期间用作洗涤缓冲液,以帮助减少背景染色。
活化试剂-细胞刺激试剂(含Brefeldin A)
12-肉豆蔻酸酯-13-乙酸和离子霉素与蛋白质转运抑制剂 Brefeldin A 的优化混合物,适用于激活细胞和增加细胞因子的产生。 Brefeldin A抑制从内质网到高尔基复合体的转运,导致细胞因子在细胞内积聚,从而增强细胞内荧光染色的检测。
蛋白质转运抑制剂
我们提供两种蛋白质转运抑制剂,可用于增强细胞内细胞因子染色。由于细胞因子和趋化因子通常会分泌,因此需要使用这些抑制剂将蛋白质捕获在细胞内,会导致细胞因子在高尔基体和内质网中积聚。这些抑制剂的选择和培养条件可能需要根据被染色的物种和细胞因子进行优化。
  • 莫能菌素:该抑制剂通过干扰高尔基体跨膜中的Na+/H+转运而发挥作用。
  • 布雷非菌素A:这种抑制剂通过将蛋白质从高尔基体重新分配到内质网而起作用。
Fc封闭
Fc受体存在于单核细胞、巨噬细胞、树突细胞和B细胞上。顾名思义,它们通过其恒定的Fc 结构域而不是抗原特异性Fab结构域结合抗体。这可能导致误报。为了防止这种类型的结合,已经开发了封闭剂以确保仅观察到抗原特异性结合。
  • Mouse Seroblock – 用于阻断小鼠细胞上的 Fc 受体
  • Human Seroblock – 用于阻断人体细胞上的 Fc 受体
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