TRIzol Reagent

库存 ：50

英文名 ：TRIzol Reagent

保质期 ：2年

供应商 ：上海博尔森生物科技有限公司

保存条件 ：2-8℃

规格 ：250U

描述：TRIzol Reagent 是一种可提取动植物样品中RNA 的制品。样品在 TRIzol Reagent 中能够充分被裂解，在样品匀浆或裂解过程中，它可保持 RNA 的完整性，同时裂解细胞，溶解细胞内含物。TRIzol Reagent 具有很强的广谱性，可以适用于各种样品的总 RNA 提取，提取过程方便快速，整个操作在一小时内便可以完成。该试剂可用于小量样品（50-100 mg 组织、1x10⁶细胞）也适用于大量样品（≥1g组织、>10⁷细胞）。对人、动物、植物组织、细菌均适用，可同时处理大量不同样品，整个提取过程在一小时内即可完成。分离的总RNA蛋白质和 DNA污染极低，可用于NorthernBlot、反转录、ployA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和基因克隆。
储存：2-8℃避光保存，可保存 2 年。
注意：该试剂含有强变性剂，请勿直接于皮肤接触或吞咽，若接触到皮肤或眼睛请尽快到医院处理。实验时务必穿实验服，戴手套。
操作方法
自备试剂：氯仿，异丙醇，70％乙醇（DEPC 水配置），Rnase
Free H₂O。
Ⅰ 实验前准备：
RNA 制备的关键是要抑制细胞中的 RNA 分解酶和防止所用器具及试剂中的 RNA 分解酶的污染。因此，在实验中必须采取以下措施：戴一次性干净手套；使用 RNA 操作专用实验台；在操作过程中避免讲话等等。通过以上办法可以防止实验者的汗液、唾液中的 RNA 分解酶的污染。
注意事项：
1. 尽量使用一次性塑料器皿，若用玻璃器皿，应在使用前用0.1%DEPC 水溶液在 37℃处理 12h，然后在 120℃高压灭30min 以除去残留的 DEPC。
2. 用于 RNA 实验的试剂，须使用干热灭菌（180℃，60min）或使用上述方法进行 DEPC 水处理灭菌后的玻璃容器盛装（也可以使用 RNA 实验用的一次性塑料容器)，使用的无菌水须用 0.1%的 DEPC 处理后再进行高温高压灭菌。3. RNA 实验用的试剂和无菌水都应专用，避免混用后交叉污染。
Ⅱ 实验操作


常见问题分析
1. 抽提率低。可能原因：（a. 样品裂解或匀浆处理不彻底；b. RNA 沉淀未完全溶解）
2. A260/A280<1.65。可能原因：（a. 检测吸光度时，RNA 样品没有溶于水，而溶于了 TE 中；b．样品匀浆时加的组织量过多；c．分层后，吸取上清液不足 500μl；d．吸取水相时混入了有机相）
3. DNA 污染过多。可能原因：（a. 样品匀浆时加的试剂量太少或组织量过多；b. 样品中含有有机溶剂）解决方法：使用该试剂通常基因组 DNA 污染含量<0.1ng/μl，如需要彻底去除 DNA 的污染，请使用 Rnase Free DNase I消化去除基因组 DNA 污染。如使用金牌 cDNA 第一链反转录试剂盒(含基因组去除剂) 则无需提前消化去除基因组 DNA 污染，该试剂盒中包含了去除基因组 DNA 污染的试剂。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！