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Circleligase II
企业认证
10次
目录号:M027-01A
一、产品介绍:
Circleligase II是一种热稳定性酶,可以在没有互补序列存在的情况下催化具有5'-磷酸基团和3'-羟基基团的单链DNA(ssDNA)/单链RNA (ssRNA)的自环化,该反应不依赖于ATP。
二、产品特点
可在标准反应条件下,高效催化长度为15-200nt的ssDNA / ssRNA发生链内环化;
可催化单链底物与5'磷酸化/腺苷酸化的单链DNA接头连接。
三、产品用途
1) 产生环状的单链DNA分子,用于滚环复制或者滚环转录的实验研究。
2) 用于cfDNA/ctDNA测序,甲基化测序等。
四、检测方法
1)连接产物经20% /8 M 尿素的PAGE胶检测,线性DNA分子的迁移速度较环状DNA分子快。
2)加入核酸外切酶I ( Exo I ),37℃反应45min,线性DNA被完全消化,而环状单链DNA分子不受外切酶的影响。 Exonuclease I,能够从ssDNA 的3'-OH 末端分解生成 5'-单核苷酸,对ss DNA具有较高的特异性,不分解双链 DNA 及 RNA。
五、检测结果
Circleligase II连接结果检测(变性PAGE胶)
lane1: 未经Circleligase II和外切酶处理的70nt线性单链DNA;
lane2: Circleligase II处理后的70nt单链DNA环化产物 ;
lane3: 70nt线性单链DNA环化产物经Exo I酶切处理结果。
For research use only.
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