pET-32a(+)-NSP10质粒

价格： ￥950

品牌：YLKBIO

货号：YLK-ZL0151

产品详情

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库存：100

英文名：pET-32a(+)-NSP10 plasmid

CAS号：/

保质期：90天

供应商：优利科（上海）生命科学有限公司

保存条件：-20℃

规格：质粒干粉

产品名称：pET-32a(+)-NSP10质粒
产品规格：质粒干粉
有效期：90天，请尽快转化。
保存温度：一般在-20℃，置于-80℃保存时间更长。
运输方式：常温运输，1周内。
应用领域：质粒载体
生长条件：LB+氨苄青霉素，37℃，克隆菌株BL21(DE3)
注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。（请向客服QQ索要质粒信息目录）

1.溶解：收到质粒干粉后，请加入 20μl 无菌水至管底，溶解质粒，室温静置 1min；
2.混合（吸附质粒）： 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀，冰上放置 30min；
3.热激导入： 42℃静置 90s；
4.收缩膜孔：冰浴 2min；
5.修复培养：毎管加 800μl LB 液体培养基，37 ℃培养 1h 150 r/min；
6.筛选培养：将适当体积（100 μl）的复苏细胞，涂布在相应抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（琼脂面务必干燥后），倒置培养 12-16h，出现菌落。
7.提取：挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中，震荡培养 12-16h，根据试验需要提取质粒。

pET-32a(+)-NSP10质粒培养基：LB+50mcg/ml氨苄青霉素：酵母膏 5.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 10.0g，蒸馏水 1.0L，pH 7.0。121℃，15min灭菌。灭菌结束后，培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素，浓度50mcg/ml。