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品系 :/
ATCC Number :/
细胞类型 :细胞系
肿瘤类型 :/
CAS号 :无
供应商 :优利科(上海)生命科学有限公司
库存 :100
注册证号 :/
英文名 :无
生长状态 :贴壁生长
年限 :永久
运输方式 :快递形式
器官来源 :/
是否是肿瘤细胞 :/
细胞形态 :上皮细胞样
免疫类型 :/
物种来源 :人
相关疾病 :/
组织来源 :/
规格 :1×10⁶cells/T25培养瓶
CHO/dhFr-[CHO-DXB11]仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷)(带STR鉴定)详细描述细胞中文名称:CHO/dhFr-[CHO-DXB11]仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷)(带STR鉴定)
名称 | CHO/dhFr- [CHO-DXB11] (仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷)) |
种属 | 中国仓鼠 |
年龄(性别) | 雌性,成年 |
组织来源 | 正常卵巢 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景描述 | CHO/dhFr-细胞为二氢叶酸还原酶缺陷细胞。在没有HT(次黄嘌呤-胸腺嘧啶)时,CHO/dhFr-细胞会死亡;CHO/dhFr-细胞生长培养基中加氨甲喋呤,可以防止对药物低抗性的回变细胞的生长。 |
生长培养基 | IMDM+10% FBS+HAT添加剂+1% P/S |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃ |
1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养
CHO/dhFr-[CHO-DXB11]仓鼠卵巢细胞(二氢叶酸还原酶缺陷)(带STR鉴定)收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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