NK92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞(带STR鉴定)

品系 ：/

ATCC Number ：CRL-2407

细胞类型 ：细胞系

肿瘤类型 ：/

CAS号 ：无

供应商 ：优利科（上海）生命科学有限公司

库存 ：100

注册证号 ：/

英文名 ：NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK

生长状态 ：悬浮细胞

年限 ：永久

运输方式 ：快递形式

器官来源 ：/

是否是肿瘤细胞 ：/

细胞形态 ：淋巴母细胞样

免疫类型 ：/

物种来源 ：人

相关疾病 ：/

组织来源 ：/

规格 ：1×10⁶cells/T25培养瓶

NK92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞(带STR鉴定)详细描述

细胞英文名称：NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK

细胞中文名称：NK92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞(带STR鉴定)
 

名称	NK-92 (人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞) (STR鉴定正确)
别称	NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK
种属	人类
年龄（性别）	男性，50岁
组织来源	外周血
生长特性	悬浮细胞
细胞形态	淋巴母细胞样
背景描述	NK-92细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株IL-2依赖型NK细胞株。NK-92细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示它能杀死K562细胞和Daudi细胞。NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。NK-92细胞有以下特征：CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面标记阳性；CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面标记阴性。
生长培养基	MEMα＋0.2mM Inositol＋0.1mM β-mercaptoethanol＋0.02mM Folic Acid＋100-200U/mL recombinant IL-2＋12.5% HS＋12.5% FBS＋1% P/S
推荐传代比例	5×10^5-1×10^6cells/mL
推荐换液频率	2~3次/周
倍增时间	~40-50小时
冻存条件	冻存液：90% FBS+10% DMSO+100-200U/mL recombinant IL-2温度：液氮
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
注意事项	该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液；请勿直接倒掉细胞培养液。
保藏机构	ATCC; CRL-2407 DSMZ; ACC-488

STR位点信息

Amelogenin	X,Y	D21S11	31.2,32
CSF1PO	11,12	FGA	20,22
D2S1338	19,20	PentaD	10,12
D3S1358	15	PentaE	12
D5S818	12,13	TH01	6,9.3
D7S820	10,11	TPOX	8
D8S1179	12	vWA	18
D13S317	9,12	D1S1656	11,12
D16S539	11,12	D6S1043	11,12
D18S51	12,17	D12S391	19
D19S433	14,15

1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；

2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。

3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养



NK92人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞(带STR鉴定)收到后处理

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。