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文献和实验
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保质期 ：一年
保存条件 ：BCA试剂室温保存。蛋白标准-20°C保存。
库存 ：大量
供应商 ：Bestbio-贝博
规格 ：250 assays/1000 assays
产品简介：
碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
BCA 法快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小。BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞蛋白提取过程中，常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可用BestBio贝博Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
产品组成：
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产品组成
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301001（250 assays）
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301002(1000 assays)
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蛋白标准(1mg/ml)
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0.5ml
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2ml
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BCA试剂A
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50ml
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200ml
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BCA试剂B
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1ml
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4ml
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使用方法：
A．96孔酶标板测定：
1. BCA工作液配制。根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B（50:1）配制适量BCA工作液，充分混匀。
2. 标准曲线绘制。取一块酶标板，按以下表格数据加入试剂：
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孔号
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0
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1
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2
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3
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4
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5
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6
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7
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蛋白标准（ml）
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0
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1
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2
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4
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8
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12
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16
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20
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去离子水（ml）
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20
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19
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18
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16
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12
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8
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4
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0
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BCA工作液（ml）
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200
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200
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200
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200
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200
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200
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200
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200
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对应的蛋白含量（mg）
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0
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1
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2
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4
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8
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12
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16
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20
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3. 振荡混匀后，37℃放置30分钟。
4. 用酶标仪测定A562，以不含BSA的光吸收值为空白对照。
5. 以蛋白含量（mg）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。
6. 样品测定：将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度，取20ml样品，加入200ml BCA工作液，混匀后37℃放置30分钟，然后以0号孔为对照，测定样品吸收值A562。
7. 根据测得的吸收值，在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
8. 计算蛋白浓度：以查得的蛋白含量除以样品体积20ml，再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
B．比色皿测定
按照比色皿规格，与以上方法相同，适当按比例增加各溶液体积即可。
储存条件：
BCA试剂室温保存。蛋白标准-20°C保存。 有效期：一年。
上海贝博生物科技有限公司
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