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文献和实验
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库存 :50
英文名 :AZENTA
供应商 :AZENTA安升达
保存条件 :-20℃保存
规格 :50ul/100ul/200ul
GsmartI BsmBⅠ
(10 U/μL)
产品编号及组成:
产品编号 | GWE521S | GWE521M | GWE521L |
GsmartI BsmBⅠ(μL) | 50 | 100 | 200 |
10X Digest Buffer 3.1 | 1ml | 1ml | 1ml |
使用说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
产品简介:
- 识别位点及反应条件:
识别序列 | 缓冲液 | 反应条件 | 灭活条件 |
5'...CGTCTC(N)1↓...3' 3'...GCAGAG(N)5↑...5' |
10×Digest buffer 3.1 | 55℃,1h | 80℃,20min |
- 活性单位定义:
在55℃,50μL反应体系中反应1h,将1μg λ DNA完全酶切的酶量定义为1个活性单位,即1U.
保存条件:
-20℃保存。
质量控制
- 星号活性检测:
将1μL GsmartI BsmBⅠ与1μg λ DNA于55℃反应1小时后,未检测到由于其他核酸酶污染或星号活性而引起的底物非特异性降解。
- 非特异性内切酶活性检测:
使用本内切酶与1μg超螺旋质粒DNA共同温育1小时后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒DNA仍然处于超螺旋状态。
推荐使用方法:
- 单酶切可以参考如下反应体系:
10×Digest Buffer 3.1 (μL) | 2 |
DNA (μL) | X (1μg) |
GsmartI BsmBⅠ (μL) | 1 |
Sterile ddH2O (μL) | 17-X |
Total Volume (μL) | 20 |
Incubation Temperature | 55℃ |
Incubation Time | 1 hour |
说明:DNA可以是质粒,纯化的PCR产物,基因组DNA。
- 双酶切或多酶切:
- 参考上表设置反应体系,所有限制性内切酶体积总和不超过总反应体积的1/10。
- 如果限制性内切酶需要不同的反应温度,先使用需要较低反应温度的限制酶在相应的温度条件下反应1小时,然后加入另一种限制酶在较高的温度条件下反应1小时。
甲基化修饰影响
Dam | Dcm | CpG |
无影响 | 无影响 | 序列重叠时酶切受阻 |
Azenta安升达
实名认证
金牌会员
入驻年限:6年