SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

价格: ¥150 - 570

品牌:Abiowell

货号:AWB0058/AWB0058a/AWB0058b

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产品详情

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库存 :999

英文名 :SDS-PAGE Gel Kit

供应商 :Abiowell

保存条件 :RT

规格 :30T/150T

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

产品简介:

本产品包括SDS-PAGE凝胶制备所需全套试剂,只需自备纯水,即可制备高质量各种浓度的变性PAGE凝胶,方便、快捷。本试剂盒在分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。

操作步骤(仅供参考):

根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。

(一)灌 制 分 离 胶

1、 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。

注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。

2、 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer和纯水在小烧杯或试管中混合。

3、 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。

4、 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1cm的水层,使凝胶表面保持平整。

5、 静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。

(二)灌制浓缩胶

1、 去除覆盖在分离胶上的水层。

2、 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer和纯水在一个小烧杯或试管中混合。

3、 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。

4、 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。

5、 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。

6、 静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。

7、 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。

8、 进行常规电泳操作。

注意事项:

1、 10%APS配制后分装-20℃保存。APS溶液不稳定,应尽量减少室温存放时间,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20℃保存的10%APS。

2、 PAGE凝胶的凝聚速度与温度以及APS、TEMED的用量密切相关;在其它条件不变的情况下,可通过改变APS及TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作;附表中的APS及TEMED量可供参考,应根据实际操作情况做适当的调整。

3、 在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。

4、 在分离胶上层加纯水时要小心操作,加水时速度不能太快。

5、 Acrylamide具有神经毒性,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

6、 本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。

产品组成:
名称 AWB0058a30T AWB0058b
150T
storage
试剂(A):30%Acr-Bis(29:1) 100ml 500ml 4
试剂(B):1.5M Tris-HCl(pH 8.8) 100ml 500ml RT
试剂(C):10% SDS 5ml 25ml RT
试剂(D):Ammonium Persulfate 0.5g 1.5g RT
试剂(E):TEMED 0.7ml 3.5ml 4
试剂(F):1M Tris-HCl(pH6.8) 15ml 75ml RT
 
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围:
SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围
6% 50-150KD
8% 30-90KD
10% 20-80KD
12% 12-60KD
15% 10-40KD





 



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