普鲁士蓝染色液（DAB增强法）

保存条件 ：-20℃，避光，6个月

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供应商 ：北京索莱宝科技有限公司

规格 ：4*10ml

普鲁士蓝染色液（DAB增强法）


普鲁士蓝染色试剂盒（增强型）
货号：G1428
规格：4×2mL（试用装）/4×10mL/4×20mL
保存：-20℃, 避光保存, 有效期6个月。
产品组成：

试剂名称		4×2mL	4×10mL	4×20mL	保存
试剂(A):Perls 染色工作液	试剂(A1):Perls A液	1mL	5mL	10mL	室温，避光
	试剂(A2):Perls B液	1mL	5mL	10mL	室温
临用前按照1：1混匀即为Perls 染色工作液。
试剂(B)：孵育工作液	试剂(B1):孵育浓缩液	0.2mL	1mL	2×1mL	2-8℃，避光
	试剂(B2):孵育稀释液	1.8mL	9mL	18mL	室温
临用前按照1：9混匀即为孵育工作液。
试剂(C)：增强工作液	试剂(C1):增强A液	1.9mL	9.5mL	19mL	-20℃，避光
	试剂(C2):增强B液	0.1mL	0.5mL	1mL	2-8℃，避光
临用前按照19：1的比例混匀即为增强工作液。
试剂(D):复染液		2mL	10mL	20mL	室温，避光

产品说明：
Perl's铁染色法是检测细胞和组织中非血红素铁的常用组织化学方法之一，通过形成蓝色的普鲁士蓝沉淀检测骨髓及肝、脾、肾等组织细胞中的铁离子，然而，对于含铁不丰富的器官，如脑组织，运用此法常常由于蓝色沉淀形成过少而无效。普鲁士蓝染色试剂盒（增强型）利用级联放大的原理对阳性信号进行了放大显示，适用于含铁较不丰富或铁沉积较少的组织铁染色。
自备材料：
恒温箱或水浴锅、湿盒、1×PBS、蒸馏水
操作步骤：（仅供参考）

1. 组织石蜡包埋切成3-7um的切片。切片常规脱蜡复水。
2. 试剂盒从冰箱取出复温20min至室温（25-30℃），湿盒注水置于37℃恒温箱预热20min。
3. 按照1：1的比例配置Perls染色工作液，滴加到切片上至完全覆盖组织，置于湿盒内37℃孵育20min。
4. 取出切片，蒸馏水轻轻冲洗三次，每次10s，按照1：9配置孵育工作液。
5. 切片滴加孵育工作液至完全覆盖组织，置于湿盒内37℃孵育10-20min。（见注意事项4）
6. 取出切片，1×PBS轻轻浸洗三次，每次60s，按照19：1的比例配置增强工作液。
7. 切片滴加增强工作液至完全覆盖组织，置于湿盒内37℃孵育10-20min。（见注意事项5）
8. 取出切片，1×PBS轻轻浸洗三次，每次5s，滴加复染液染色3-5min。
9. 蒸馏水浸洗10min。
10. 梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

染色结果：

常规细胞核	红紫色到蓝色
阳性细胞	黄棕色到黄褐色
胞质	浅紫色或无色

注意事项：

1. 收到试剂盒之后建议将试剂(C1)取出，按照单次使用量分装或直接放置-20℃冰箱保存，剩余试剂盒放置2-8℃冰箱保存。
2. 避免使用酸性固定液处理组织，铬酸盐处理也会影响铁的存在。
3. 所有工作液久置容易失效，建议现用现配，在2小时内使用完毕。
4. 孵育工作液孵育时间建议参考组织大小和细胞密度进行适当调整。
5. 增强工作液处理建议镜下控制着色程度，当阳性细胞着黄棕色到棕黑色时即可。
6. 如无法保证37℃恒温处理可根据室温适当延长或缩短处理时间。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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