产品详情
文献和实验
相关推荐
库存 :100
英文名 :Diagnostic Kit for EAEC DNA(Real-Time PCR Method)
CAS号 :无
保质期 :1年
供应商 :优利科(上海)生命科学有限公司
保存条件 :-20℃
规格 :50T
肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸扩增检测试剂盒(荧光-PCR 法)
【产品名称】
通用名称:肠集聚性大肠杆菌 (EAEC)核酸扩增检测试剂盒(荧光-PCR 法)Name :Diagnostic Kit for EAEC DNA(Real-Time PCR Method)
【包装规格】50T/盒
【预期用途】
本试剂盒适用于检测水样粪便,疑似污染的水、食物等样本中的肠集聚性大肠 杆菌,用于肠集聚性大肠杆菌感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。【检验原理】
本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术,设计一对肠集聚性大肠杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光 PCR 技术对肠集聚性大肠杆菌的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。【试剂组成】
名 称 | 规 格 |
酶液 | 50μL×1 管 |
EAEC 反应液 | 500μl×2 管 |
EAEC 阳性质控品 | 50μL ×1 管 |
阴性质控品 | 250μL ×1 管 |
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。【适用仪器】
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。【标本采集】
水样便取 0.5~1mL;疑似污染的食物取 1g【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。【使用方法】
- 样品处理(样本处理区)
- 样本前处理
-
- DNA 提取
- DNA 的提取也可以采用优利科(上海)生命科学有限公司生产的 DNA 提取试剂盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。
- DNA 提取
- 试剂配制(试剂准备区)
试剂 | EAEC 反应液 | 酶液 |
用量(样本数为 N) | 20μL | 1μL |
- 加样(样本处理区)
- PCR 扩增(核酸扩增区)
- 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;
- 设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25μL;
|
- 结果分析判定
- 结果分析条件设定
-
- 结果判断
可疑:检测通道 35<Ct 值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为 35<Ct 值
≤38,且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性; 阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。
- 质控标准
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
- 产品性能指标
最低检测限:1.0×103copies/mL。
精密度:批内、批间精密度检测 Ct 值的变异系数(CV)均小于等于 3%。
- 检测方法的局限性
- 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;
- 样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;
- 阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;
- 病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;
- 不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;
- 试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;
- 本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
【注意事项】
- 所有操作严格按照说明书进行;
- 试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
- 反应液应避光保存;
- 反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
- 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
- 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
- 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
优利科(上海)生命科学有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:4年