转基因大豆品系 GTS40-3-2 核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）价格

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CAS号：无

保质期：1年

供应商：优利科（上海）生命科学有限公司

保存条件：-20℃

规格：50T

转基因大豆品系 GTS40-3-2 核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

产品说明

转基因检测系列产品可针对食品、饲料等样品中转基因成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品参照《GB/T 19495.4-2018 转基因产品检测实时荧光定性聚合酶链式反应（PCR）检测方法》和《SN/T 1204-2016 植物及其加工产品中转基因成分实时荧光 PCR 定性检验方法》等标准开发，用于转基因大豆品系GTS40-3-2 成分的检测，检出限为 0.01%。

产品组成（48 测试）

043042M
试剂	含量
A-GTS40-3-2-P	20 μL × 8 管× 6 排
NG-P	100 μL × 2 支
PG-GTS40-3-2-P	100 μL × 1 支

适用仪器

ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。

自备耗材和仪器

①冰盒；②移液器（0.5-10 μL，10-100 μL，100-1000 μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴；⑥均质机、搅拌机或研钵等研磨器具；⑦电子天平。

注意事项
1. 本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
  1. 第一区：样本制备区。
  2. 第二区：模板添加区。
  3. 第三区：扩增及产物分析区。

★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。

1. 实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
2. 严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
3. 反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30

秒。

1. 反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
2. 不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
样品处理

参照《GB/T 19495.3-2004 转基因产品检测核酸提取纯化方法》或其他标准处理样品，除了处于食物和（或）饲料链起始端的农产品和粗加工材料（如粉碎的产品），大多数工业加工的食品经过了物理、化学及酶的处理。这些处理会降低 DNA 的含量及纯度。因此，每一方法的适用性及重复性会随特异样品而异，一种特定的 DNA 提取方法的性质特征依赖于被研究的食品种类。实验室样品的代表性应符合《GB/T 19495.7-2004 转基因产品检测抽样和制样方法》。制备的样本保存待用。
★ 若使用非一次性研磨器研磨样品，一定要彻底清洗研磨器并充分干燥后再进行下一份样品的研磨，防止交叉污染

实验操作

模板制备（样本制备区）

建议使用配套植物基因组 DNA 提取试剂盒，具体过程详见产品说明书。

添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）

剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管，放置在室温待解冻后，离心 30 秒后揭开封口膜，向每管反应液中分别加入 5 μL 模板，顺序为 NG、待测样品模板、PG-GTS40-3-2-P。盖好配套的 PCR 管盖后，涡旋混匀，离心30 秒，立即进行PCR 扩增反应。

扩增反应（扩增及产物分析区）

使用荧光定量PCR 仪，荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择NONE。按下列条件设置扩增反应：

	PCR 循环			荧光收集位点
去污染	37℃	10 分钟	1 个循环	—
预变性	95℃	5 分钟	1 个循环	—
扩增	95℃	15 秒	40 个循环	—
扩增	60℃	1 分钟	40 个循环	※

基线和阈值设定

基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点。

结果判定

测试样品检测 Ct 值≥40，曲线为直线或轻微斜线，无“S”型扩增曲线，可判定样品不含有 GTS40-3-2 品系或含量低于检出限；
测试样品检测 Ct 值≤36，曲线呈“S”型扩增曲线，可判定样品含有GTS40-3-2 品系；
测试样品检测 Ct 值在 36～40 之间，应调整模板浓度，重做实时荧光 PCR。再次扩增后的样品检测 Ct 值＜40，则可判定样品含有 GTS40-3-2 品系；再次扩增后的样品检测 Ct 值≥40，则可判定该样品不含有 GTS40-3-2 品系或含量低于检出限。
★NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。