mRNA 纯化试剂盒

价格： ￥2800

品牌：YLKBIO

货号：YLK-PCR0096

产品详情

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库存：100

英文名：mRNA Isolation Kit

CAS号：无

保质期：1年

供应商：优利科（上海）生命科学有限公司

保存条件：-20℃

规格：50T

产品及特点

构建 cDNA 文库、蛋、白质体外翻译和 RT-PCR 检测稀有的 mRNA 等研究常常需要从总 RNA 中分离 mRNA。 mRNA 只占总 RNA 的 1%左右，但由于带poly（A）尾巴，所以可以通过与 Oligo（dT）纤维素的亲和结合而与其他 RNA（如 rRNA、tRNA 等）分离开。本产品就是基于此原理开发的、专门用于从总 RNA 中提取 mRNA 的试剂盒。它具有下列特点：

一站式，，即开即用，非常方便。
一次可以处理约 10-15 ug 总 RNA，从中可得 0.1-0.5 ug 左右的mRNA。
Oligo（dT）纤维素吸附能力强，每克可以吸附 50-80 OD 的 mRNA，相当于 2000-3000 ug mRNA。
离心法、只需要离心就可以完成，免去了常规的灌柱、洗柱等繁琐操作。
得到的 mRNA 可以直接用于构建 cDNA 文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。
本试剂盒足够 25 次微量mRNA 提取实验。

规格及成分

成分	编号	小扁盒包装
结合液	80817a	100 mL
Oligo(dT)纤维素	80817b	25 mg
RNase-free 水	80403	10 mL
微量核酸沉淀剂	50903	10 mL
使用手册	80817sc	1 份

运输及保存
常温运输，收到货后 Oligo(dT)纤维素最好放-20℃长期保存，有效期一年。

自备试剂

75%乙醇

使用方法

本产品提供 25 mg Oligo(dT)纤维素，每克 Oligo(dT)纤维素能够结合 50-80 OD 的 mRNA。

将 250uL 结合液加入到装有 25 mg Oligo(dT)纤维素的离心管中。
洗涤纤维素：取 10 uL（相当于 1mg Oligo (dT)纤维素）与 0.5 mL 结合液混匀，室温放置 5 分钟。10 uL 相当于 1mg Oligo (dT)纤维素。剩余部分放

-80℃保存。1000g 离心 30 秒，小心吸弃结合液后留 Oligo (dT)纤维素沉淀待用。

将自备的总 RNA 100uL（如果体积不足 100 uL，用 RNase-free 水补足）， 65℃加热 5 分钟。

加入等体积（100uL）的结合液，混匀后冷却到室温。

全部转移到装有 Oligo(dT)纤维素的离心管中，混匀后室温放置 5 分钟，期间颠倒混匀数次。
4℃ 1000 g 离心 5 分钟，小心将上清转移到一个离心管中。此上清液是去除了mRNA 的总 RNA。可以-80℃保存作为阴性对照。如果 mRNA 回收失败也可以再次用于纯化。
洗涤一次：加入 0.5 mL 结合液，混匀后 4℃ 1000g 离心 5 分钟，小心弃上清。
重复上步的洗涤步骤 2-4 次。
在加入 50 uL RNase-free 水，混匀后 4℃ 1000 g 离心 5 分钟，小心收集上清（mRNA）。
重复上步 1 次。
将各次收集的mRNA 混合，即为 mRNA 溶液。
按微量核酸沉淀剂的方法沉淀 mRNA，具体操作如下：
按 2:1 的比例将微量核酸沉淀剂与 mRNA 溶液混合。注意：微量核酸沉淀剂取用前需要摇匀。
室温 15000g 离心 10 分钟。
弃上清后加自备的 75%乙醇 1 mL，振荡混匀。
15000g 离心 5 分钟，弃上清。
再短暂离心后小心吸弃上清，沉淀即为回收的 mRNA 沉淀，可溶于RNase-free 水中直接使用或放-80℃保存。