Trelief® Seamless Cloning Kit/擎科TSINGKE

库存 ：充足

英文名 ：Trelief® Seamless Cloning Kit

保质期 ：-25~-15℃保存，保质期1年，低温运输。

供应商 ：北京擎科生物科技股份有限公司

规格 ：20 次/100次

【产品简介】
Trelief® Seamless Cloning Kit利用同源重组的原理，可将1~5个片段定向重组至载体中，可有效克隆50 bp~20 kb的片段到线性化载体中。将载体通过酶切或PCR线性化，并在扩增片段正、反向PCR引物5´端引入15~25 nt同源序列，使得扩增产物之间以及扩增产物与线性化载体之间各有一段同源序列，各片段和线性化载体在重组酶的作用下，仅需50 ℃反应15~45 min即可进行转化，克隆阳性率可达95%以上。其工作原理如下： 2. 通过酶切或 PCR得到线性化载体 ；
3. 15 min重组反应 ；
4. 转化后获得重组载体；

【产品特点】
 快速：重组反应仅需要15~45 min；
多片段克隆：线性化载体可有效组装1~5个片段；
高效：阳性率可达95%以上；
无缝：不引入额外的序列。

【产品应用】
无缝克隆
定点突变
高通量克隆

【注意事项】
1. 载体需要进行充分酶切后使用，否则未切开的载体会影响后续的阳性克隆鉴定。
2. 一般情况下，多片段重组效率低于单片段重组，为保证效率，建议切胶纯化后再进行重组反应。
3. 单片段和线性化载体重组时，摩尔比常为2:1。多片段和线性化载体重组时，各个片段的摩尔数宜保持一致。
4. 配制重组体系时，应先加线性化载体、片段和水，最后加2×Seamless CloningMix，体系配制最好在冰上，配制完后应立即用于重组反应。