tRF实时定量PCR

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提供商：研载生物

服务名称：tRF RNA检测

一、技术简介
实时PCR(real-time PCR)，属于定量PCR（Q-PCR）的一种，以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。实时荧光定量PCR技术是在普通PCR反应体系中加入荧光试剂，利用荧光信号实时检测PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR能够专一、灵敏、快速、高重复性地精确定量起始模板浓度。

tRF是由tRNA切割产生，由于tRF长度太短，且与tRNA序列完全重叠，不能通过传统的实时定量PCR进行检测。我司通过在tRF两端引入人工合成序列，设计特殊的跨连接位点的定量PCR引物，可以精确检测微量样品中tRF表达水平。

二、实验流程
1. 提取RNA。
2. DNAse I 消化样品RNA 中的DNA。
3. RNA琼脂糖凝胶电泳。
4. RNA反转录为cDNA。
5. cDNA与引物质量检测。
6. 利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况。
7. 定量 PCR检测。
8. 分析扩增曲线和溶解曲线。

三、服务说明及结果
1. 客户提供：样本。
2. 公司提供：高质量的RNA、扩增曲线图、熔解曲线图、完整报告。
3. 实验周期：5-10个工作日。