转基因油菜品系MS11核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）价格

库存：999

保质期：12个月

供应商：上海博尔森生物科技有限公司

保存条件：-20℃

规格：48T 非一管式

转基因油菜品系MS11核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

产品说明
转基因检测系列产品可针对食品、饲料等样品中转基因成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于转基因油菜品系 MS11 成分的检测，检出限为 0.01%。
◆ 产品组成（48 测试）

◆ 适用仪器
ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。
◆ 自备耗材和仪器
①冰盒；②移液器（0.5-10 μL，10-100 μL，100-1000 μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴；⑥均质机、搅拌机或研钵等研磨器具；⑦电子天平。
◆ 注意事项
1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
1）第一区：试剂准备区。
2）第二区：样本制备区。
3）第三区：扩增及产物分析区。
★ 分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。
2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
◆ 样品处理
参照《GB/T 19495.3-2004 转基因产品检测核酸提取纯化方法》或其他标准处理样品，除了处于食物和（或）饲料链起始端的农产品和粗加工材料（如粉碎的产品），大多数工业加工的食品经过了物理、化学及酶的处理。这些处理会降低 DNA 的含量及纯度。因此，每一方法的适用性及重复性会随特异样品而异，一种特定的 DNA 提取方法的性质特征依赖于被研究的食品种类。实验室样品的代表性应符合《GB/T 19495.7-2004 转基因产品检测抽样和制样方法》。制备的样本保存待用。
★ 若使用非一次性研磨器研磨样品，一定要彻底清洗研磨器并充分干燥后再进行下一份样品的研磨，防止交叉污染。
◆ 实验操作
1. 试剂配制（试剂准备区，放置于冰盒中进行）：
若有 N 个待检样品，则参照下表，按照 N+2 个数量计算反应液用量（N 个待检样品+1 个空白对照+1 个阳性对照），涡旋混匀，离心 30 秒，分装于 0.2mL PCR 管中。

2．模板制备（样本制备区）
建议使用配套植物基因组 DNA 提取试剂盒，具体过程详见产品说明书。
3．添加模板（样本制备区，放置于冰盒上进行）
在步骤 1 中已含有反应液的 PCR 管中加入 5μL 模板，顺序为 NG-P、待测样品模板、PG-MS11-P。涡旋混匀，离心 30 秒，立即进行 PCR 扩增反应。
4．扩增反应（扩增及产物分析区）
使用荧光定量 PCR 仪，荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 NONE。
按下列条件设置扩增反应：

5．基线和阈值设定
基线调整取 3-15 个循环的荧光信号，阈值线应超过空白对照扩增曲线的最高点。
◆ 结果判定
测试样品检测 Ct 值≥40，曲线为直线或轻微斜线，无“S”型扩增曲线，可判定样品不含有转基因油菜品系 MS11或含量低于检出限；
测试样品检测 Ct 值≤36，曲线呈“S”型扩增曲线，可判定样品含有转基因油菜品系 MS11；
测试样品检测 Ct 值在 36～40 之间，应调整模板浓度，重做实时荧光 PCR。再次扩增后的样品检测 Ct 值＜40，
则可判定样品含有转基因油菜品系 MS11；再次扩增后的样品检测 Ct 值≥40，则可判定该样品不含有转基因油菜品系 MS11 或含量低于检出限。
NG 反应管结果显示“阴性”，PG 反应管结果显示“阳性”，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。