小鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型

缺血性脑梗死具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点。由于小鼠的脑血管解剖特点与人类较为相似，故小鼠广泛应用于缺血性脑梗死的研究当中。缺血性脑梗死除了会影响缺血的区域之外，还会影响相关的神经甚至整个中枢神经系统。因此小鼠缺血性脑梗模型有助于研究神经连接和大脑整体的改变。这有助于推动缺血性脑卒中等脑科学的进步。(1)

随着分子影像学的发展，利用缺血组织中某些具有特征性标记物的改变来进行细胞分子水平的早期、特异性诊断越来越受到重视。同时，这类用于诊断的特异性对比剂还可以携带治疗性药物，使得治疗和诊断做到二合一。(2)

本文以小鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型为例，介绍一种实验动物脑卒中研究中广泛运用的建模方法，供参考。

小鼠大脑中动脉栓塞（MCAO模型）制作方法

1// 实验动物和材料

线栓和小鼠

硅胶头直径mm	硅胶长度mm	线径-尼龙线号	总线长mm	动物体重g	小鼠品系
0.2-0.21	3.0-4.0	0.1-0.12	30	22-24	C57BL/6

2// 模型制作

将小鼠进行呼吸诱导麻醉（异氟烷）后，以仰卧位固定于操作台上，继续维持麻醉，常规消毒，备皮，取颈部正中切口，分离右侧颈部总动脉（CCA）、劲内动脉（ICA）和颈外动脉（ECA），结扎ECA远心端，在ECA起始端留置结扎线，用动脉夹将ICA远心端、CCA近心端夹闭。在ECA远心端结扎线外离断，将ECA拉至与ICA成一条直线，于结扎线近端用显微剪剪一斜口，将MACO栓线缓缓送入，栓线通过ECA近心端结扎线进入ICA后，单道结扎ECA近心端结扎线，使栓线与血管相对固定，随即松开ICA上的动脉夹，缓慢上提ECA近心端结扎线，将栓线缓慢送入，进线至线栓刻度位置。

缺血后再灌注：栓线插入40 min后拔出，随后将ECA近心端结扎线结扎，松开CCA近心端动脉夹，碘伏消毒后逐层缝合切口。

小鼠术后37度保温和护理。

3// 行为学评分

采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价，0分：无神经功能缺损症状；1分：出现左侧 Honer征，轻度神经功能缺损；2分：提尾对侧前肢内旋，肩内收，中度神经功能缺损；3分：向对侧转圈、向对侧倾倒，重度神经功能缺损；4分：不能自发行走，部分意识丧失。

小鼠侧倾倒，评分为3分。

4// 病理组织学分析

沿脑桥上界面切断，去除嗅球，称全脑重，立即放入-20℃冰箱， 20 min 后取出，由前向后做连续冠状切片（切片厚度2 mm）。将脑切片置入0.1% TTC溶液中，后放入恒温振荡器中，37℃避光染色30 min，将脑切片取出后放入4% 中性甲全溶液中固定 24 h，取出脑片，相机拍照，用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。

模型应用

MACO模型主要应用于脑卒中疾病以及相关药物等研究。

声明

本文涉及的动物建模操作经实验动物福利伦理委员会（IACUC）审批和通过。

参考文献

1. 张添源，徐安定，逯丹. 小鼠脑梗死模型中全脑成像技术应用展望. 海南医学. 2020, 31(15): 2017-2019.

2. 韩冰，范海健，朱斌，秦国初等. 小鼠缺血性脑梗死模型的制作及7T MR 成像的实验研究. 医学影像学杂志. 2012, 22(10): 1755-1757.

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