人NO检测试剂盒

库存 ：大量

英文名 ：Nitric Oxide Assay Kit

CAS号 ：无

保质期 ：6个月

供应商 ：普利莱APPLYGEN

保存条件 ：4°C保存

规格 ：500次

NO检测试剂盒 (Nitric Oxide Assay Kit）E1030

适应物种：人、猴、猪 、牛 、羊 、鸡 、兔 、小鼠 、大鼠
 

货号	产品名称	规格	价格（元）
E1030	NO检测试剂盒（NitricOxideAssayKit）	500次	420

适应物种：人、猴、猪 、牛 、羊 、鸡 、兔 、小鼠 、大鼠
描述： (Nitric oxide，NO)是一种重要的气体信号分子和效应分子，可以作为第二信使参与许多生物效应和生理病理过程。体内NO含量低，半衰期短，且易被氧化。Griess反应一直是最经典的生物样品NO测定方法，反应产物的光密度OD值与NO浓度呈线性关系。本试剂盒基于Griess 反应原理，采用优化的反应条件和比色法测量液体样品NO的浓度。方法简单，线性范围2.5~800µM。按照每150 µl反应体系含50 µl样品推算，相当于样品的检测灵敏度约为300 pmol/50 µl。
特点：
1、    试剂盒基于最经典的Griess反应原理。操作方法简单方便，灵敏度高。
2、    线性范围2.5-800uM。
3、    适用于血液、尿、培养基中的检测。
4、    发表的SCI文章超过50篇
规格：500次
储存：4ºC避光保存6个月有效
准备步骤：
测定前取出试剂升温到室温。
标准品稀释：每次测量均新做标准曲线，用与样品相似的液体稀释标准品。
A.    取100 mmol/L NaNO2标准品8µl，加到992µl蒸馏水中，得到1000µl之800 µM管。
B.    从800 µM管取200µl加入200µl蒸馏水得400µM管，然后依次取样用蒸馏水倍比稀释，得到200、100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.57 μM管。最后设置不加标准品的0浓度管。
C.    从以上各管各取50 µl 加入酶标板。
D.    等待后续加入样品，以及加入Griess试剂后，一起反应并测量。
样品测量：
1.         取50 µl标准品或样品，加入96孔板中。
2.         每孔加入50 µl Griess R1
优化步骤：室温避光放置5分钟。此步骤可进一步提高灵敏度。但NO浓度较高时可省略。
3.         每孔加入50 µl Griess R2。
4.         室温避光放置5分钟。
5.         540 nm (490-550 nm均可)测定吸光度。应在30 min内测完，以免退色降低灵敏度。
6.         制备标准曲线：以吸光度OD值为x轴，标准品浓度为y轴，用Excel做图并得到标准曲线公式。
7.         将样品OD值代入公式计算NO浓度。
说明：
1.         在30 min内测完，以免退色而降低灵敏度。
2.         快速测定：如果样品NO浓度较高，则可将Griess R1和R2预先1:1等体积混合后，各取100 µl混合试剂与50 µl样品反应测定。
3.         样品所赖以存在的液体的内在成分会干扰测定，降低OD值和灵敏度。干扰程度：尿液>血清>血浆>培养基>蒸馏水。
4.         每次测量必须新做标准曲线，尽量用与样品相同的液体稀释标准品。
5.         细胞培养基中酚红的红色颜色不影响测定。
 
以下为使用普利莱NO检测试剂盒发表的文章，供参考：
1、Ji Y, Sun X, Liu X Y, et al. Toxoplasma gondii: effects of exogenous nitric oxide on egress of tachyzoites from infected macrophages[J]. Experimental parasitology, 2013, 133(1): 70-74.
2、Hong Q, Qi K, Feng Z, et al. Hyperuricemia induces endothelial dysfunction via mitochondrial Na+/Ca 2+ exchanger-mediated mitochondrial calcium overload[J]. Cell calcium, 2012, 51(5): 402-410.
3、Ding Y, Zhang Z F, Dai X Q, et al. Myricetin protects against cytokine-induced cell death in RIN-m5f β cells[J]. Journal of medicinal food, 2012, 15(8): 733-740.