SP6 High Yield RNA Transcription Kit

规格 ：25次/100次

碧云天生产的SP6 High Yield Transcription Kit，即SP6高产量RNA转录试剂盒，是一种利用SP6 RNA Polymerase能在相对较短时间内进行体外RNA大量转录的特性而研发的RNA体外大量转录试剂盒。本试剂盒能以携带有SP6 Promoter (ATTTAGGTGACACTATAG)序列的线性化质粒、PCR产物或合成的DNA片段等为模板，体外转录合成mRNA、lncRNA、shRNA等多种类型的RNA，每次转录的RNA量实测可以达到80-100μg。

本试剂盒兼容m1ψTP、ψTP，可以用于体外大量转录合成带有m1ψ等修饰的mRNA，便于制备成mRNA疫苗。本试剂盒也兼容生物素、FITC、Cy3等标记的核苷酸，便于体外大量转录合成生物素、FITC、Cy3等标记的RNA探针。

本试剂盒转录合成的RNA可用于体外翻译、转染细胞表达目的基因、RNA结构与功能研究、核酸酶生化研究、RNase保护实验、RNA剪切、微阵列分析、显微注射和mRNA疫苗等相关研究。

本试剂盒经过一系列优化，可以仅使用1μg的模板，在20μl的反应体系中，在2小时内产生多达80-100μg的RNA。本试剂盒对于长链和短链的RNA都有很好的转录效果，也可以按比例放大反应体系，从而可以轻松获得毫克级的RNA。

碧云天的SP6 High Yield Transcription Kit以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行转录时的产量参考图1。

图1.碧云天的SP6 High Yield Transcription Kit以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行转录时的产量参考图。在20µl反应体系中，通过使用1.0μg 2878bp的线性化质粒DNA为模板，在37℃分别孵育0、15、30、60、120、240min，随后70℃孵育10min终止反应。加入等体积水后再加入1µl DNase I，37℃孵育15min消化模板DNA，得到的RNA转录产物的长度为198nt。用苯酚/氯仿抽提以及乙醇沉淀并用超微量紫外分光光度计检测得到的RNA产物量。实际产量会因具体实验条件的不同而产生差异，本图仅供参考。

本试剂盒中的ATP、CTP、GTP和UTP都是单独提供的，以便于添加或置换修饰核苷酸。

一个小包装的本产品可以进行25个20μl体系的体外反转录反应，一个中包装的本产品可以进行100个20μl体系的体外反转录反应。每个反应体系通常可以获得多达80-100μg体外转录的RNA。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
R7020S-1	SP6 RNA Polymerase	50µl
R7020S-2	RNase Inhibitor	15µl
R7020S-3	DNase I	25µl
R7020S-4	SP6 Reaction Buffer (10X)	60µl
R7020S-5	ATP (100mM)	30µl
R7020S-6	CTP (100mM)	30µl
R7020S-7	GTP (100mM)	30µl
R7020S-8	UTP (100mM)	30µl
R7020S-9	SP6 Control Template (0.5µg/µl)	6µl
R7020S-10	Nuclease-free Water	1ml
—	说明书	1份

 

产品编号	产品名称	包装
R7020M-1	SP6 RNA Polymerase	200µl
R7020M-2	RNase Inhibitor	60µl
R7020M-3	DNase I	100µl
R7020M-4	SP6 Reaction Buffer (10X)	240µl
R7020M-5	ATP (100mM)	110µl
R7020M-6	CTP (100mM)	110µl
R7020M-7	GTP (100mM)	110µl
R7020M-8	UTP (100mM)	110µl
R7020M-9	SP6 Control Template (0.5µg/µl)	12µl
R7020M-10	Nuclease-free Water	2ml
—	说明书	1份

保存条件：

-20℃保存，至少一年有效。

注意事项：

由于涉及RNA操作，需要严格按照RNA操作的规范进行，避免RNase污染，相关试剂和耗材需要经过DEPC处理以去除RNase或者确保是RNase free的。

如果希望合成加帽的RNA，须自备Cap analog，如m⁷(3’-O-methyl)-G(5’)ppp(5’)G等。如果希望合成生物素、FITC、Cy3等标记的RNA或带有特殊修饰的RNA，相应的修饰NTP需要自备。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

碧云天生产的High Yield Transcription Kit，即高产量RNA转录试剂盒，能在相对较短时间内进行体外RNA大量转录的试剂盒。本系列试剂盒能够体外转录合成mRNA、lncRNA、shRNA等多种类型的RNA，可用于如RNA结构与功能研究、RNA酶保护、探针杂交、RNAi等应用，也可用于体外翻译、转染、显微注射或其他下游应用。

本系列产品特点与区别为：

产品编号	R7016	R7018	R7020
产品名称	T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit	T7 High Yield RNA Transcription Kit	SP6 High Yield RNA Transcription Kit
转录模板	需携带有T7  Promoter 序列	需携带有T7  Promoter 序列	需携带有SP6  Promoter序列
转录产量	150-200ug （20μl反应体系，2小时）	150-200ug （20μl反应体系，2小时）	80-100μg （20μl反应体系，2小时）
特点	预混合ATP、CTP、GTP和UTP	单独提供ATP、CTP、GTP和UTP	单独提供ATP、CTP、GTP和UTP