保存条件 ：-15℃避光防潮

保质期 ：12个月

库存 ：1

ReadiLink iFluor 647 缺口平移 dsDNA 标记试剂盒

	货号	17404	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	10 Reactions
	Ex (nm)	656	Em (nm)	670
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

ReadiLink iFluor 647 缺口平移 dsDNA 标记试剂盒提供了一种简单有效的方法，可以使用明亮且光稳定的 iFluor 647 染料标记双链 DNA 样本。标记试剂盒为 DNA 标记所需的完整工作流程提供了所有必要的试剂。该方法使用 DNAse 和 DNA 聚合酶的组合来切割 DNA 螺旋的一条链，iFluor 647 染料与之结合。此外，该试剂盒允许用户通过调整 iFluor 647-dUTP 偶联物与 dTTP 的比例来优化掺入和产品大小。它与多种样品材料兼容，包括细菌人工染色体 (BAC) DNA、人类基因组 DNA、纯化的 PCR 产物、超螺旋和线性化质粒 DNA。得到的 iFluor 647 标记 DNA 可用于多种分子生物学技术，例如荧光原位杂交 (FISH)。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的ReadiLink iFluor 647 缺口平移 dsDNA 标记试剂盒。

 

 

适用仪器

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荧热循环仪
仪器规格：	N/A

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 准备 DNA 样本
2. 向试管中加入试剂
3. 短暂混合并离心
4. 在 15°C 下孵育 60 分钟
5. 将反应置于冰上，然后加入停止溶液并在 65°C 下加热
6. 使用前在冰上放置 5 分钟或在 4°C 下储存
7. 纯化标记的 DNA

 注：在开始实验之前，解冻所有成分。在开始标记过程之前，将所有试剂短暂涡旋至底部。

 

实验步骤

表 1. 各反应每管试剂组成

成分	规格
DNA样本	1 µg DNA 在无核酸酶水中稀释至终体积 34 µL
Nick Translation 缓冲液	5 µL
dNTP 混合物	5 µL
dTTP	2 µL
iFluor 647-dUTP 工作溶液	2 µL
DNA聚合酶I	1 µL
DNA酶I	1 µL
总容积	50 µL

可以优化 iFluor 647-dUTP（组分 A）：dTTP（组分 E）的比例以获得最佳标记条件。
可以优化孵育时间以获得更好的标记。 更长的孵育时间将有助于更多的标记，但可能会缩短最终产品的尺寸。
1.向干净的（无核酸酶）0.5 mL 微型离心管或 0.2 mL PCR 管中，按表 1 中所示的顺序添加试剂。
2.通过短暂的涡旋和短暂的离心小心混合试剂。
3.将反应在 15°C 下孵育 60 分钟。
4.孵育后，将反应置于冰上。
5.要终止反应，请添加 5 µL 停止溶液并将样品加热至 65 °C。
6.使用前在冰上放置 5 分钟或在 4°C 下储存。
7.纯化标记的 DNA。