库存 ：1

供应商 ：威奥生物

检测限 ：详见说明书

检测方法 ：夹心法

应用 ：科研

适应物种 ：人

标记物 ：详见说明书

样本 ：血清/ 血浆/ 细胞培养上清/组织匀浆/其它生物体液

规格 ：48T/96T

威奥生物生产的ELISA试剂盒采用“夹心法”:将捕获抗体包被于酶标板上，捕获样品及标准品中的靶蛋白，生物素化的检测抗体与靶蛋白结合， SABC复合物与生物素化检测抗体结合，形成免疫复合物，加入TMB显色液后，若反应孔中有靶蛋白则显蓝色，加入终止液变黄色，检测过程中游离的成分均被洗去，用酶标仪在498 nm处测OD值，靶蛋白浓度与OD值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出标本中靶蛋白的浓度。
品质高：凭借多年的生物试剂盒研发经验，提供高灵敏度、高特异性的ELISA检测试剂盒； 技术精：技术服务人员拥有丰富的操作经验和精湛的技术，严格操作，保证高效、精准地完成检测； 服务全：根据客户实验要求设计、制定实验方案，同时为客户提供专业的数据分析服务； 价格低：以优惠的价格为客户提供最全面的服务，

1. TMB 显色液的配置：使用前 10 分钟，将 TMB 显色液 A 液和 B 液 1：1 混合，避光放置备用。
2. 如果您检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最高值，建议重新检测，请根据实际情况，适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数)。

检测程序:

1. 加样：空白孔加入 50μl 标准品/样品稀释液，其余孔各加入标准品或待测样品 50ul，将反应板混匀后置 37℃， 40 分钟。
2. 洗板：用 1×洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，每孔加入 1×洗液 350μl，每次震荡/浸泡 1-2 分钟，向滤纸上印干。
3. 空白孔加入 100ul 生物素化抗体稀释液，其余孔各加入 1×的生物素化抗体工作液 100ul，混匀后置 37℃，30分钟。
4. 洗板：同上。
5. 每孔加入 SABC 复合物工作液 100ul，混匀后置 37℃，20 分钟。
6. 洗板：同上。
7. 每孔加入提前配置好的 TMB 混合液 100ul，混匀后置 37 ℃暗处反应 10-20 分钟（具体显色时间根据显色结果而定）。
8. 每孔加入 100ul 终止液，混匀，30 分钟内用酶标仪在 450nm 处测吸光值。

结果判断与计算：

1. 所有 OD 值建议减除空白孔值后再进行计算，如空白孔 OD 低于 0.1，也可以直接计算。
2. 以标准品浓度作横坐标，OD 值作纵坐标，手工绘制或用软件绘制标准曲线，根据样品 OD 值计算出相应含量，再乘以稀释倍数即可。

试剂盒性能:

1、 灵敏度:可测浓度小于 9.4pg/ml。
2、 特异性:同时可检测重组或天然的人 FOLR1  ，不与人其它细胞因子有交叉反应。
3、 重复性:板内，板间变异系数均小于 10%。

注意事项

1. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测，每次检测都应做标准曲线。
2. 洗涤过程很关键，洗涤不充分将导致精确度误差及 OD 值错误地升高，从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象，37℃水浴使结晶完全溶解后再配制洗涤液。
3. 检测时所有试剂都要恢复到室温，板条开封后剩余板条需封好，放回袋中 1   个月内用完。
4. 试剂盒使用超敏 TMB  溶液，显色过深时会出现沉淀状，属正常现象，混匀即可，不影响结果判读。
5. 说明书以试剂盒内纸质版为准,本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！