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品系 :永生化人肥大细胞系 LUVA
ATCC Number :无
细胞类型 :永生化人肥大细胞系 LUVA
肿瘤类型 :/
CAS号 :无
供应商 :优利科(上海)生命科学有限公司
库存 :100
注册证号 :/
英文名 :LUVA
生长状态 :贴壁生长
年限 :永久
运输方式 :快递形式
器官来源 :永生化人肥大细胞系 LUVA
是否是肿瘤细胞 :是
细胞形态 :正常
免疫类型 :/
物种来源 :永生化人肥大细胞系 LUVA
相关疾病 :/
组织来源 :永生化人肥大细胞系 LUVA
规格 :T25培养瓶
永生化人肥大细胞系 LUVALUVA细胞具有异染色质颗粒,对类胰蛋白酶、组织蛋白酶G和羧肽酶A3有免疫反应。它们表达编码FcεRI、c-kit、糜酶、类胰蛋白酶、组氨酸脱羧酶、羧肽酶A3和半胱氨酸白三烯1型受体的转录本。流式细胞术证实FcεRI、c-kit和FcγRII表达均匀。FcεRI交联诱导β-己糖胺酶、前列腺素D(2)、血栓素A(2)和巨噬细胞炎性蛋白1β的释放。永生化与供体中已知的c-kit基因突变或细胞内c-kit的体细胞突变无关,也与c-kit自身磷酸化无关。 LUVA细胞是一种永生化的人MC细胞系,在无干细胞因子的情况下可以维持,并显示出高水平的正常信号c-kit和FcεRI。这些细胞将被证明对功能性人类MC研究有价值
细胞英文名称 | LUVA | 细胞中文名称 | 永生化人肥大细胞系 |
形态特性 | 上皮细胞 | 生长特性 | 贴壁生长 |
培养体系 | SFM ( 500ml ) , L-glutamine ( 2MM final ) , 5ml Pen Strep ( 10 , 000 U / ml ) | ||
传代方法 | 1:2传代 | 传代情况 | |
冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
备注 | 悬浮细胞离心收集 |
STR:
1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养
永生化人肥大细胞系 LUVA收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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