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品系 :人胶质瘤细胞;U373细胞系
ATCC Number :无
细胞类型 :人胶质瘤细胞;U373细胞系
肿瘤类型 :/
CAS号 :无
供应商 :优利科(上海)生命科学有限公司
库存 :100
注册证号 :/
英文名 :U373
生长状态 :贴壁
年限 :永久
运输方式 :快递形式
器官来源 :人胶质瘤细胞;U373细胞系
是否是肿瘤细胞 :是
细胞形态 :正常
免疫类型 :/
物种来源 :人胶质瘤细胞;U373细胞系
相关疾病 :/
组织来源 :人胶质瘤细胞;U373细胞系
规格 :T25培养瓶
人胶质瘤细胞;U373细胞系Problematic cell line: Misidentified/contaminated. Shown to be a U-251MG derivative. This cell line is not the original astrocytoma cell line established in 1973 at the University of Uppsala. See U-373MG Uppsala (CVCL_2818) for the original U-373MG cell line.细胞鉴定错误,不建议使用,与U251交叉污染
细胞英文名称 | U373 | 细胞中文名称 | 人胶质瘤细胞 |
形态特性 | 上皮样 | 生长特性 | 贴壁生长 |
培养体系 | RPMI1640+10%FBS | ||
传代方法 | 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 | 传代情况 | |
冻存条件 | 无血清细胞冻存液 | ||
备注 | 悬浮细胞离心收集 |
STR:
1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养
人胶质瘤细胞;U373细胞系细胞操作步骤参考
1.首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。 若有,请拍照, 并及
时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2. 用 75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会
有少量从瓶壁脱落; 先不要打开培养瓶盖, 将细胞置于细胞培养箱内静置培养 4 小时以
上,以便稳定细胞状态。
3. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮) 、 细胞形态、 所用
基础培养基、血清比例、所需细胞因子、 传代比例、换液频率等。
4. 静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依
据) ; 建议细胞传代培养后, 定期拍照、 记录细胞生长状态。
5. 贴壁细胞:若细胞生长密度超过 80%,可正常传代;若未超过 80%, 移除细胞培养瓶内培
养基, 预留 5ml 左右继续培养,直至细胞密度达 80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧
松。
6. 悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至 50ml 无菌离心管内, 1200rpm 离心 5min,
离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入 5ml 培养基吹打、重悬。镜检时, 若细
胞密度超过 80%,可将细胞悬液分至 2 个细胞培养瓶内培养,补加培养基至 5ml;若细胞
密度未超过 80%, 将细胞悬液移至原瓶继续培养, 直至细胞密度达 80%左右时再进行传代
操作。
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