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文献和实验
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库存 :102
英文名 :果糖含量测试盒
保质期 :12个月
供应商 :上海酶联生物科技有限公司
保存条件 :避光,低温保存
规格 :100管/96样
果糖含量测试盒
微量法
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
果糖是一种为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。
测定原理:
果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100ml×1瓶,4℃保存;
试剂一:1mg/mL标准液10mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体 25ml×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体 8ml×1瓶, 4℃避光保存;
试剂四:粉剂0.5g×1瓶,常温保存。
果糖提取:
称取0.1~0.2g样本,常温研碎;加入0.5mL提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于80℃水浴锅中10min(盖紧,以防止水分散失),振荡3~5次,冷却后,4000g,25℃离心10min,取上清;加入少量(约2mg)试剂四,80℃脱色30min(盖紧,以防止水分散失);再加入0.5mL提取液,4000g,25℃离心10min,取上清液测定。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。
2、样本测定,(在EP管中依次加入下列试剂):
试剂(μL) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
样本 | 30 | ||
试剂一 | 30 | ||
蒸馏水 | 30 | ||
试剂二 | 210 | 210 | 210 |
试剂三 | 60 | 60 | 60 |
果糖含量测试盒
果糖含量计算:
1、果糖含量(mg/mg prot)=(C标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr
此法需要自行测定蛋白浓度。
2、果糖含量(mg/g鲜重)=(C标准管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.03mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
注意:低检测限为100ng/g鲜重或1ng/mg prot
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