HBScript cDNA反转录试剂盒

规格 ：100T/200T

产品名称	产品编号	规格
HBScript cDNA反转录试剂盒	HB-Script-100	100 T

* HBScript cDNA反转录试剂预混Oligo dT和Random Primer
  HBScript cDNA合成试剂盒包含gDNA Remover、配套buffer和HBScript cDNA Synthesis Master Mix (5X)。gDNA Remover可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染，保证后续结果更加可靠。HBScript cDNA Synthesis Master Mix (5X)含有逆转录反应所需的所有组分（Buffer，dNTP， Reverse Transcriptase，RNase inhibitor，Random primers/Oligo (dT)18 primer mix），只需加入RNA模板和 RNase-free H₂O即可进行逆转录反应，并同时终止gDNA Remover的作用，保证cDNA的完整性。
 

编号	组分	产品规格 (100 T)
HBScript001	RNase-free H2O	1 mL
HBScript002	HBScript cDNA Synthesis Master Mix (5X)	200μL
HBScript003	gDNA Remover	50μL
HBScript004	10×gDNA Remover Buffer	50μL

  -20℃保存。有效期一年。

  1）HBScript cDNA Synthesis Master Mix(5X)含有高浓度的甘油，需充分混匀，准确吸取；
2） 如果加入RNA模板体积较大，请确保RNA是溶于水中而不是TE中，因为TE会对gDNA去除以及后续反应产生抑制；
  1、RNA变性（可选步骤）：
将RNA样品于65°C孵育5 min，然后置于冰上。
2. 残留基因组DNA去除
在RNase free离心管中配制如下混合液，用移液器轻轻吹打混匀。37℃孵育5 min。

组分	使用量
RNase-free H2O	To 5μL
gDNA Remover	0.5μL
10×gDNA Remover Buffer	0.5μL
模板RNA	Total RNA: 10 pg -1 μg或mRNA:10 pg-500 ng

3. 逆转录反应体系配制（10 μL体系）
在第1步的反应管中直接加入HBScript cDNA Synthesis Master Mix (5X)，用移液器轻轻吹打混匀。

组分	使用量
第1步的反应液	5μL
5×HBScript cDNA Synthesis Master Mix	2μL
RNase-free H2O	To 10μL

4.逆转录程序设置

温度	时间
42℃	15 min-30min
85℃	10 min
4℃	备用

【注】：逆转录温度：推荐使用42℃。对于高GC含量模板或者复杂模板，可将逆转录温度提高到60℃。对于qPCR推荐反应时间15min，长片段PCR需适当延长反应时间。