人登革热 NS1 抗原酶联免疫分析试剂盒

供应商 ：优利科（上海）生命科学有限公司

库存 ：100

样本 ：血清、血浆、组织液等液体样本

标记物 ：hrp辣根过氧化物酶

适应物种 ：人

应用 ：科研

检测方法 ：酶联免疫法

检测限 ：详询

规格 ：48T/96T

人登革热 NS1 抗原酶联免疫分析试剂盒

96T

本试剂盒仅供研究使用。

使用目的：
本试剂盒定性测定人血清，血浆及相关液体样本中登革热 NS1 抗原的表达。

相关图片（一）：


实验原理：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ ELISA）测定标本中人登革热 NS1 抗原。用纯
化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中登革热 NS1 抗原相结合，经洗涤除去未
结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经
过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转
化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与 CUTOFF 值相比较，
从而判定标本中人登革热 NS1 抗原的存在与否。
试剂盒组成：

1	30 倍浓缩洗涤液	20ml× 1 瓶	7	终止液	6ml× 1 瓶
2	酶标试剂	6ml× 1/瓶	8	阳性对照	0.5ml× 1 瓶
3	酶标包被板	12 孔× 8 条	9	阴性对照	0.5ml× 1 瓶
4	样品稀释液	6ml× 1 瓶	10	说明书	1 份
5	显色剂 A 液	6ml× 1 瓶	11	封板膜	2 张
6	显色剂 B 液	6ml× 1 瓶	12	密封袋	1 个

标本要求：
1．标本处理：血清、血浆标本可直接检测
2．标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测，可将标本在-20℃保存一个月，
但应避免反复冻融。
3．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

相关图片（二）：


操作步骤：
1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1
孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照（标准品） 50µl。然后在待测
样品孔先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，
尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液加蒸馏水至 600ml 后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A 50µl，再加入显色剂 B 50µl，轻轻震荡混匀， 37℃避光显色
15 分钟
10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。


结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.15
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为登革热 NS1 抗原阴性
阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为登革热 NS1 抗原阳性

相关图片（三）：


注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为 630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须
注意安全。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：； 2-8℃。
2．有效期： 6 个月