人CC趋化因子受体7(CCR-7)酶联免疫分析试剂盒

供应商 ：优利科（上海）生命科学有限公司

库存 ：100

样本 ：血清、血浆、组织液等液体样本

标记物 ：hrp辣根过氧化物酶

适应物种 ：人

应用 ：科研

检测方法 ：酶联免疫法

检测限 ：0.3pg/ml-16pg/ml

规格 ：48T/96T

人CC趋化因子受体7(CCR-7)酶联免疫分析试剂盒


本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：                                                           
0.3pg/ml-16pg/ml

使用目的：
本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中CC趋化因子受体7(CCR-7)含量。

相关图片（一）：


实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人CC趋化因子受体7(CCR-7)水平。用纯化的人CC趋化因子受体7(CCR-7)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入CC趋化因子受体7(CCR-7)，再与HRP标记的CC趋化因子受体7(CCR-7)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的CC趋化因子受体7(CCR-7)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人CC趋化因子受体7(CCR-7)浓度。
试剂盒组成
 

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品（32pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

相关图片（三）：


标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
 

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

16pg/ml	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
8pg/ml	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
4pg/ml	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
2pg/ml	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1pg/ml	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

1. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
3. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
6. 温育：操作同3。
7. 洗涤：操作同5。
8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
10. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：


计算
  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

相关图片（三）：


注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
  6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月