游离脂肪酸FFA含量试剂盒(测植物组织)

游离脂肪酸FFA含量试剂盒(测植物组织)

价格: ¥356

品牌:mlBio/酶联生物 品牌认证

货号:mlE3543

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英文名 :游离脂肪酸FFA含量试剂盒(测植物组织)

保质期 :12个月

供应商 :上海酶联生物科技有限公司

保存条件 :避光 , 低温保存

规格 :50管/24样

游离脂肪酸FFA含量试剂盒(测植物组织)    
分光光度法 
注    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:
FFA既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关,也可反映食物贮藏中的品质变化。

测定原理:
在弱酸性条件下,FFA与铜盐反应生成铜皂,在715nm处有特征吸收峰,在一定范围内游离脂肪酸含量与显色程度呈线性关系。

自备仪器和用品:
研钵、台式离心机、震荡仪、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿。

游离脂肪酸

试剂组成和配制:
试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存。

样品中FFA提取:
组织用蒸馏水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,捣碎后按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~12的比例(建议称取约0.1g组织,加入1.2mL试剂一)加入试剂一,震荡提取3h,8000g,4℃离心10min,取上清液待测。

测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到715 nm。
2. 对照管:取上清液1mL,加0.5mL试剂二,充分震荡5min,室温静置5min,取上层0.8mL于1mL玻璃比色皿,调零。
3. 测定管:取上清液1mL,加0.5mL试剂三,充分震荡5min,室温静置5min,取上层0.8mL于1mL玻璃比色皿,测定吸光值,记为A。
注意:对照管每个样品都需要测定一次。

游离脂肪酸FFA含量试剂盒(测植物组织)    
FFA含量计算公式:
标准曲线:y=0.0075 x+ 0.0055,R2=0.994
(1)按样本蛋白浓度计算
FFA(nmol/mg prot)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr
(2)按样本质量计算
FFA(nmol/g 鲜重)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=160×(A-0.0055)÷W
V1:加入样本体积,1mL;V2:提取液体积,1.2mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。

注意事项:
1.蛋白含量不可直接用提取的上清液直接测定,可用蒸馏水或缓冲液或生理盐水选用本公司的BCA法蛋白含量测定试剂盒。
2.低检出限为2 nmol/mL。

游离脂肪酸
 

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