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文献和实验
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库存 :83
英文名 :总多糖含量测定试剂盒
保质期 :12个月
供应商 :上海酶联生物科技有限公司
保存条件 :避光 , 低温保存
规格 :50管/48样
总多糖含量测定试剂盒
分光光度法
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
多糖是生物体中广泛存在的物质,是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,它是生物体内重要的生物大分子,是维持生命活动正常运转的基本物质之一。
测定原理:
利用水提醇沉法提取总多糖,苯酚-硫酸法测定总多糖含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。
试剂的组成和配制:
试剂一:12mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:无水乙醇,自备;
试剂三:浓硫酸,自备。
总多糖提取:
样本烘干粉碎,称取约0.05g样本,加入1mL水,充分匀浆。100℃水浴提取2h(必须盖紧盖子防止水分流失),冷却后10000g离心10min,取上清。吸取0.2mL上清,慢慢加入0.8mL无水乙醇,混匀后4℃静置过夜,10000g离心10min,弃上清,沉淀中加入1mL水,充分混匀溶解沉淀。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至490nm,蒸馏水调零。
2、吸取400µL上清,加入200µL试剂一和1mL浓硫酸,混匀后90℃水浴20min,流水冷却。取1mL加入比色皿,于490nm下测定吸光值A。
总多糖含量测定试剂盒
总多糖含量计算:
以葡萄糖作为对照品,标准条件下测定回归方程为y = 15.962x - 0.0037,R2 = 0.9973,x为葡萄糖含量(mg/mL),y为吸光值。
总多糖含量(μg/g干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000
=313.24×(A+0.0037) ÷W
V1:醇沉后重新溶解后的体积,1mL;V2:进行醇沉的体积,0.2mL;V3,提取时加入水的体积,1mL;
上海酶联生物科技有限公司
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