pSAT6-CEYFP-C1-B植物双分子荧光质粒

pSAT6-CEYFP-C1-B植物双分子荧光质粒

价格: ¥100 - 1000

品牌:Xybio

货号:P1406

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产品详情

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保存条件 :-20

保质期 :2年

英文名 :pSAT6-cEYFP-C1-B

库存 :100

供应商 :上海烜雅生物科技有限公司

CAS号 :/

规格 :干粉/液体

基本信息
名称:pSAT6-CEYFP-C1-B植物双分子荧光质粒
别称: pSAT6-cEYFP-C1-B
启动子: 35S
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度


质粒属性
载体宿主: 植物
载体用途: 双分子荧光
基因种属: 空载体
基因类型: BIFC
原核抗性: Amp
筛选标记:  
荧光蛋白:


质粒简介
 pSAT6-CEYFP-C1-B质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供

质粒图谱


质粒序列
LOCUS       Exported                4081 bp ds-DNA     circular SYN 26-SEP-2017
DEFINITION  synthetic circular DNA
ACCESSION   .
VERSION     .
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 4081)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
  JOURNAL   Exported Sep 26, 2017 from MiaoLingPlasmid
            http://www.miaolingbio.com
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4081
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     misc_feature    435..1322
                     /label=2X35S promoter + TL enhancer
     misc_feature    1323..1523
                     /label=nEYFP
     misc_feature    1524..1589
                     /label=MCS
                     /note="multiple cloning site"
     misc_feature    1602..1812
                     /label=35S terminator
     rep_origin      complement(2262..2850)
                     /direction=LEFT
                     /label=ori
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"
     CDS             complement(3021..3881)
                     /codon_start=1
                     /gene="bla"
                     /product="beta-lactamase"
                     /label=AmpR
                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                     related antibiotics"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                     LIKHW"
     promoter        complement(3882..3986)
                     /gene="bla"
                     /label=AmpR promoter
ORIGIN
        1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
       61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
      121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
      181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
      241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
      301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
      361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccac ccataatacc cataatagct
      421 gtttgccaac cggtcaacat gtggagcacg acacacttgt ctactccaaa aatatcaaag
      481 atacagtctc agaagaccaa agggcaattg agacttttca acaaagggta atatccggaa
      541 acctcctcgg attccattgc ccagctatct gtcactttat tgtgaagata gtggaaaagg
      601 aaggtggctc ctacaaatgc catcattgcg ataaaggaaa ggccatcgtt gaagatgcct
      661 ctgccgacag tggtcccaaa gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag
      721 acgttccaac cacgtcttca aagcaagtgg attgatgtga taacatggtg gagcacgaca
      781 cacttgtcta ctccaaaaat atcaaagata cagtctcaga agaccaaagg gcaattgaga
      841 cttttcaaca aagggtaata tccggaaacc tcctcggatt ccattgccca gctatctgtc
      901 actttattgt gaagatagtg gaaaaggaag gtggctccta caaatgccat cattgcgata
      961 aaggaaaggc catcgttgaa gatgcctctg ccgacagtgg tcccaaagat ggacccccac
     1021 ccacgaggag catcgtggaa aaagaagacg ttccaaccac gtcttcaaag caagtggatt
     1081 gatgtgatat ctccactgac gtaagggatg acgcacaatc ccactatcct tcgcaagacc
     1141 cttcctctat ataaggaagt tcatttcatt tggagaggac gtcgagagtt ctcaacacaa
     1201 catatacaaa acaaacgaat ctcaagcaat caagcattct acttctattg cagcaattta
     1261 aatcatttct tttaaagcaa aagcaatttt ctgaaaattt tcaccattta cgaacgatag
     1321 ccatgggcgg cagcgtgcag ctcgccgacc actaccagca gaacaccccc atcggcgacg
     1381 gccccgtgct gctgcccgac aaccactacc tgagctacca gtccgccctg agcaaagacc
     1441 ccaacgagaa gcgcgatcac atggtcctgc tggagttcgt gaccgccgcc gggatcactc
     1501 tcggcatgga cgagctgtac aagtccggac tcagatctcg agctcaagct tcgaattctg
     1561 cagtcgacgg taccgcgggc ccgggatcca cctgatctag agtccgcaaa aatcaccagt
     1621 ctctctctac aaatctatct ctctctattt ttctccagaa taatgtgtga gtagttccca
     1681 gataagggaa ttagggttct tatagggttt cgctcatgtg ttgagcatat aagaaaccct
     1741 tagtatgtat ttgtatttgt aaaatacttc tatcaataaa atttctaatt cctaaaacca
     1801 aaatccagtg acgcggccgc acccataata cccataatag ctgtttgcca gtaatcatgg
     1861 tcatagctgt ttcctgtgtg aaattgttat ccgctcacaa ttccacacaa catacgagcc
     1921 ggaagcataa agtgtaaagc ctggggtgcc taatgagtga gctaactcac attaattgcg
     1981 ttgcgctcac tgcccgcttt ccagtcggga aacctgtcgt gccagctgca ttaatgaatc
     2041 ggccaacgcg cggggagagg cggtttgcgt attgggcgct cttccgcttc ctcgctcact
     2101 gactcgctgc gctcggtcgt tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc aaaggcggta
     2161 atacggttat ccacagaatc aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc aaaaggccag
     2221 caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc
     2281 cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta
     2341 taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg
     2401 ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcaatgc
     2461 tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac
     2521 gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac
     2581 ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg
     2641 aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga
     2701 aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt
     2761 agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag
     2821 cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc tacggggtct
     2881 gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgagatt atcaaaaagg
     2941 atcttcacct agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta aatcaatcta aagtatatat
     3001 gagtaaactt ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg aggcacctat ctcagcgatc
     3061 tgtctatttc gttcatccat agttgcctga ctccccgtcg tgtagataac tacgatacgg
     3121 gagggcttac catctggccc cagtgctgca atgataccgc gagacccacg ctcaccggct
     3181 ccagatttat cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg agcgcagaag tggtcctgca
     3241 actttatccg cctccatcca gtctattaat tgttgccggg aagctagagt aagtagttcg
     3301 ccagttaata gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctacag gcatcgtggt gtcacgctcg
     3361 tcgtttggta tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat caaggcgagt tacatgatcc
     3421 cccatgttgt gcaaaaaagc ggttagctcc ttcggtcctc cgatcgttgt cagaagtaag
     3481 ttggccgcag tgttatcact catggttatg gcagcactgc ataattctct tactgtcatg
     3541 ccatccgtaa gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa ccaagtcatt ctgagaatag
     3601 tgtatgcggc gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaatac gggataatac cgcgccacat
     3661 agcagaactt taaaagtgct catcattgga aaacgttctt cggggcgaaa actctcaagg
     3721 atcttaccgc tgttgagatc cagttcgatg taacccactc gtgcacccaa ctgatcttca
     3781 gcatctttta ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa caggaaggca aaatgccgca
     3841 aaaaagggaa taagggcgac acggaaatgt tgaatactca tactcttcct ttttcaatat
     3901 tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat acatatttga atgtatttag
     3961 aaaaataaac aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa aagtgccacc tgacgtctaa
     4021 gaaaccatta ttatcatgac attaacctat aaaaataggc gtatcacgag gccctttcgt
     4081 c
//

质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
              收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
              1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
              加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
              6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
              将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
              挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
              四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
              穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

二、转化图片

P1113/pIRESpuro3-3×FLAG-N哺乳表达质粒
P1114/pIRESpuro3-3×FLAG-C哺乳表达质粒
P1286/pIRESpuro3-EGFP-FLAG-6×His哺乳表达质粒
P1287/pIRESpuro3-EGFP-Linker-8×His哺乳表达质粒
P1351/pECMV-3×FLAG-MCS-IRES-Puro哺乳表达质粒
P1855/pIREShyg3哺乳表达质粒
P1911/pEF1α-MCS-IRES-mCherry哺乳表达质粒
P2236/pCMV-MCS-FLAG-IRES2-EGFP哺乳表达质粒
P0182/pCAG-GFP哺乳表达质粒
P0165/pCAGGS哺乳表达质粒
P1727/pCAGIG哺乳表达质粒
P1372/pCAGGS-Myc哺乳表达质粒

 

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