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文献和实验
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保存条件 :-20
保质期 :2年
英文名 :pSAT6-cEYFP-C1-B
库存 :100
供应商 :上海烜雅生物科技有限公司
CAS号 :/
规格 :干粉/液体
基本信息名称:pSAT6-CEYFP-C1-B植物双分子荧光质粒
别称: pSAT6-cEYFP-C1-B
启动子: | 35S |
---|---|
复制子: | pUC |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培养条件: | 37度 |
质粒属性
载体宿主: | 植物 |
---|---|
载体用途: | 双分子荧光 |
基因种属: | 空载体 |
基因类型: | BIFC |
原核抗性: | Amp |
筛选标记: | |
荧光蛋白: |
质粒简介
pSAT6-CEYFP-C1-B质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4081 bp ds-DNA circular SYN 26-SEP-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4081)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sep 26, 2017 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4081
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 435..1322
/label=2X35S promoter + TL enhancer
misc_feature 1323..1523
/label=nEYFP
misc_feature 1524..1589
/label=MCS
/note="multiple cloning site"
misc_feature 1602..1812
/label=35S terminator
rep_origin complement(2262..2850)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3021..3881)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3882..3986)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgccac ccataatacc cataatagct
421 gtttgccaac cggtcaacat gtggagcacg acacacttgt ctactccaaa aatatcaaag
481 atacagtctc agaagaccaa agggcaattg agacttttca acaaagggta atatccggaa
541 acctcctcgg attccattgc ccagctatct gtcactttat tgtgaagata gtggaaaagg
601 aaggtggctc ctacaaatgc catcattgcg ataaaggaaa ggccatcgtt gaagatgcct
661 ctgccgacag tggtcccaaa gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg gaaaaagaag
721 acgttccaac cacgtcttca aagcaagtgg attgatgtga taacatggtg gagcacgaca
781 cacttgtcta ctccaaaaat atcaaagata cagtctcaga agaccaaagg gcaattgaga
841 cttttcaaca aagggtaata tccggaaacc tcctcggatt ccattgccca gctatctgtc
901 actttattgt gaagatagtg gaaaaggaag gtggctccta caaatgccat cattgcgata
961 aaggaaaggc catcgttgaa gatgcctctg ccgacagtgg tcccaaagat ggacccccac
1021 ccacgaggag catcgtggaa aaagaagacg ttccaaccac gtcttcaaag caagtggatt
1081 gatgtgatat ctccactgac gtaagggatg acgcacaatc ccactatcct tcgcaagacc
1141 cttcctctat ataaggaagt tcatttcatt tggagaggac gtcgagagtt ctcaacacaa
1201 catatacaaa acaaacgaat ctcaagcaat caagcattct acttctattg cagcaattta
1261 aatcatttct tttaaagcaa aagcaatttt ctgaaaattt tcaccattta cgaacgatag
1321 ccatgggcgg cagcgtgcag ctcgccgacc actaccagca gaacaccccc atcggcgacg
1381 gccccgtgct gctgcccgac aaccactacc tgagctacca gtccgccctg agcaaagacc
1441 ccaacgagaa gcgcgatcac atggtcctgc tggagttcgt gaccgccgcc gggatcactc
1501 tcggcatgga cgagctgtac aagtccggac tcagatctcg agctcaagct tcgaattctg
1561 cagtcgacgg taccgcgggc ccgggatcca cctgatctag agtccgcaaa aatcaccagt
1621 ctctctctac aaatctatct ctctctattt ttctccagaa taatgtgtga gtagttccca
1681 gataagggaa ttagggttct tatagggttt cgctcatgtg ttgagcatat aagaaaccct
1741 tagtatgtat ttgtatttgt aaaatacttc tatcaataaa atttctaatt cctaaaacca
1801 aaatccagtg acgcggccgc acccataata cccataatag ctgtttgcca gtaatcatgg
1861 tcatagctgt ttcctgtgtg aaattgttat ccgctcacaa ttccacacaa catacgagcc
1921 ggaagcataa agtgtaaagc ctggggtgcc taatgagtga gctaactcac attaattgcg
1981 ttgcgctcac tgcccgcttt ccagtcggga aacctgtcgt gccagctgca ttaatgaatc
2041 ggccaacgcg cggggagagg cggtttgcgt attgggcgct cttccgcttc ctcgctcact
2101 gactcgctgc gctcggtcgt tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc aaaggcggta
2161 atacggttat ccacagaatc aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc aaaaggccag
2221 caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc
2281 cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta
2341 taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg
2401 ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcaatgc
2461 tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac
2521 gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac
2581 ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg
2641 aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga
2701 aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt
2761 agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt ttgcaagcag
2821 cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc tacggggtct
2881 gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgagatt atcaaaaagg
2941 atcttcacct agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta aatcaatcta aagtatatat
3001 gagtaaactt ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg aggcacctat ctcagcgatc
3061 tgtctatttc gttcatccat agttgcctga ctccccgtcg tgtagataac tacgatacgg
3121 gagggcttac catctggccc cagtgctgca atgataccgc gagacccacg ctcaccggct
3181 ccagatttat cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg agcgcagaag tggtcctgca
3241 actttatccg cctccatcca gtctattaat tgttgccggg aagctagagt aagtagttcg
3301 ccagttaata gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctacag gcatcgtggt gtcacgctcg
3361 tcgtttggta tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat caaggcgagt tacatgatcc
3421 cccatgttgt gcaaaaaagc ggttagctcc ttcggtcctc cgatcgttgt cagaagtaag
3481 ttggccgcag tgttatcact catggttatg gcagcactgc ataattctct tactgtcatg
3541 ccatccgtaa gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa ccaagtcatt ctgagaatag
3601 tgtatgcggc gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaatac gggataatac cgcgccacat
3661 agcagaactt taaaagtgct catcattgga aaacgttctt cggggcgaaa actctcaagg
3721 atcttaccgc tgttgagatc cagttcgatg taacccactc gtgcacccaa ctgatcttca
3781 gcatctttta ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa caggaaggca aaatgccgca
3841 aaaaagggaa taagggcgac acggaaatgt tgaatactca tactcttcct ttttcaatat
3901 tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat acatatttga atgtatttag
3961 aaaaataaac aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa aagtgccacc tgacgtctaa
4021 gaaaccatta ttatcatgac attaacctat aaaaataggc gtatcacgag gccctttcgt
4081 c
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
P1113/pIRESpuro3-3×FLAG-N哺乳表达质粒 |
P1114/pIRESpuro3-3×FLAG-C哺乳表达质粒 |
P1286/pIRESpuro3-EGFP-FLAG-6×His哺乳表达质粒 |
P1287/pIRESpuro3-EGFP-Linker-8×His哺乳表达质粒 |
P1351/pECMV-3×FLAG-MCS-IRES-Puro哺乳表达质粒 |
P1855/pIREShyg3哺乳表达质粒 |
P1911/pEF1α-MCS-IRES-mCherry哺乳表达质粒 |
P2236/pCMV-MCS-FLAG-IRES2-EGFP哺乳表达质粒 |
P0182/pCAG-GFP哺乳表达质粒 |
P0165/pCAGGS哺乳表达质粒 |
P1727/pCAGIG哺乳表达质粒 |
P1372/pCAGGS-Myc哺乳表达质粒 |
上海烜雅生物科技有限公司
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钻石会员
入驻年限:7年