pLTR-G慢病毒包装质粒

pLTR-G慢病毒包装质粒

价格: ¥100 - 1000

品牌:Xybio

货号:P1657

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产品详情

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保存条件 :-20

保质期 :2年

英文名 :Plasmid#17532

库存 :100

供应商 :上海烜雅生物科技有限公司

CAS号 :/

规格 :干粉/液体

基本信息
名称:pLTR-G慢病毒包装质粒
别称: Plasmid#17532
复制子: pUC
原核抗性: Kan
筛选标记: G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度


质粒属性
载体宿主: 哺乳细胞,慢病毒
载体用途: 包装辅助
基因种属: 病毒
基因类型: ORF
原核抗性: Kan
筛选标记: Neo/G418
荧光蛋白:


质粒简介
    pLTR-G是一个慢病毒哺乳细胞VSVG包膜蛋白表达质粒。

质粒图谱


质粒序列
LOCUS       Exported                5832 bp ds-DNA     circular SYN 03-NOV-2017
DEFINITION  synthetic circular DNA
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..5832
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     CDS             782..2317
                     /codon_start=1
                     /product="vesicular stomatitis virus G glycoprotein"
                     /label=VSV-G
                     /note="Indiana strain"
                     /translation="MKCLLYLAFLFIGVNCKFTIVFPHNQKGNWKNVPSNYHYCPSSSD
                     LNWHNDLIGTALQVKMPKSHKAIQADGWMCHASKWVTTCDFRWYGPKYITHSIRSFTPS
                     VEQCKESIEQTKQGTWLNPGFPPQSCGYATVTDAEAVIVQVTPHHVLVDEYTGEWVDSQ
                     FINGKCSNYICPTVHNSTTWHSDYKVKGLCDSNLISMDITFFSEDGELSSLGKEGTGFR
                     SNYFAYETGGKACKMQYCKHWGVRLPSGVWFEMADKDLFAAARFPECPEGSSISAPSQT
                     SVDVSLIQDVERILDYSLCQETWSKIRAGLPISPVDLSYLAPKNPGTGPAFTIINGTLK
                     YFETRYIRVDIAAPILSRMVGMISGTTTERELWDDWAPYEDVEIGPNGVLRTSSGYKFP
                     LYMIGHGMLDSDLHLSSKAQVFEHPHIQDAASQLPDDESLFFGDTGLSKNPIELVEGWF
                     SSWKSSIASFFFIIGLIIGLFLVLRVGIHLCIKLKHTKKRQIYTDIEMNRLGK"
     polyA_signal    2620..2741
                     /label=SV40 poly(A) signal
                     /note="SV40 polyadenylation signal"
     rep_origin      complement(2748..3203)
                     /direction=LEFT
                     /label=f1 ori
                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                     indicates direction of (+) strand synthesis"
     promoter        3230..3334
                     /gene="bla"
                     /label=AmpR promoter
     promoter        3336..3693
                     /label=SV40 promoter
                     /note="SV40 enhancer and early promoter"
     rep_origin      3544..3679
                     /label=SV40 ori
                     /note="SV40 origin of replication"
     CDS             3728..4522
                     /codon_start=1
                     /gene="aph(3')-II (or nptII)"
                     /product="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
                     /label=NeoR/KanR
                     /note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418 
                     (Geneticin(R))"
                     /translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
                     VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
                     SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
                     GLAPAELFARLKASMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
                     LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
     polyA_signal    4754..4801
                     /label=HSV TK poly(A) signal
                     /note="herpes simplex virus thymidine kinase 
                     polyadenylation signal (Cole and Stacy, 1985)"
     rep_origin      5130..5718
                     /direction=RIGHT
                     /label=ori
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"
ORIGIN
        1 tagttattac cggactcaga tctcgagacc tagaaaaaca tggagcaatc acaagtagca
       61 atacagcagc taacaatgct gcttgtgcct ggctagaagc acaagaggag gaagaggtgg
      121 gttttccagt cacacctcag gtacctttaa gaccaatgac ttacaaggca gctgtagatc
      181 ttagccactt tttaaaagaa aaggggggac tggaagggct aattcactcc caaagaagac
      241 aagatatcct tgatctgtgg atctaccaca cacaaggcta cttccctgat tggcagaact
      301 acacaccagg gccaggggtc agatatccac tgacctttgg atggtgctac aagctagtac
      361 cagttgagcc agataaggta gaagaggcca ataaaggaga gaacaccagc ttgttacacc
      421 ctgtgagcct gcatggaatg gatgaccctg agagagaagt gttagagtgg aggtttgaca
      481 gccgcctagc atttcatcac gtggcccgag agctgcatcc ggagtacttc aagaactgct
      541 gacatcgagc ttgctacaag ggactttccg ctggggactt tccagggagg cgtggcctgg
      601 gcgggactgg ggagtggcga gccctcagat gctgcatata agcagctgct ttttgcctgt
      661 actgggtctc tctggttaga ccagatctga gcctgggagc tctctggcta actagggaac
      721 ccactgctta agcctcaata aagcttctag agatccctcg acctcgagga attctgacac
      781 tatgaagtgc cttttgtact tagccttttt attcattggg gtgaattgca agttcaccat
      841 agtttttcca cacaaccaaa aaggaaactg gaaaaatgtt ccttctaatt accattattg
      901 cccgtcaagc tcagatttaa attggcataa tgacttaata ggcacagcct tacaagtcaa
      961 aatgcccaag agtcacaagg ctattcaagc agacggttgg atgtgtcatg cttccaaatg
     1021 ggtcactact tgtgatttcc gctggtatgg accgaagtat ataacacatt ccatccgatc
     1081 cttcactcca tctgtagaac aatgcaagga aagcattgaa caaacgaaac aaggaacttg
     1141 gctgaatcca ggcttccctc ctcaaagttg tggatatgca actgtgacgg atgccgaagc
     1201 agtgattgtc caggtgactc ctcaccatgt gctggttgat gaatacacag gagaatgggt
     1261 tgattcacag ttcatcaacg gaaaatgcag caattacata tgccccactg tccataactc
     1321 tacaacctgg cattctgact ataaggtcaa agggctatgt gattctaacc tcatttccat
     1381 ggacatcacc ttcttctcag aggacggaga gctatcatcc ctgggaaagg agggcacagg
     1441 gttcagaagt aactactttg cttatgaaac tggaggcaag gcctgcaaaa tgcaatactg
     1501 caagcattgg ggagtcagac tcccatcagg tgtctggttc gagatggctg ataaggatct
     1561 ctttgctgca gccagattcc ctgaatgccc agaagggtca agtatctctg ctccatctca
     1621 gacctcagtg gatgtaagtc taattcagga cgttgagagg atcttggatt attccctctg
     1681 ccaagaaacc tggagcaaaa tcagagcggg tcttccaatc tctccagtgg atctcagcta
     1741 tcttgctcct aaaaacccag gaaccggtcc tgctttcacc ataatcaatg gtaccctaaa
     1801 atactttgag accagataca tcagagtcga tattgctgct ccaatcctct caagaatggt
     1861 cggaatgatc agtggaacta ccacagaaag ggaactgtgg gatgactggg caccatatga
     1921 agacgtggaa attggaccca atggagttct gaggaccagt tcaggatata agtttccttt
     1981 atacatgatt ggacatggta tgttggactc cgatcttcat cttagctcaa aggctcaggt
     2041 gttcgaacat cctcacattc aagacgctgc ttcgcaactt cctgatgatg agagtttatt
     2101 ttttggtgat actgggctat ccaaaaatcc aatcgagctt gtagaaggtt ggttcagtag
     2161 ttggaaaagc tctattgcct cttttttctt tatcataggg ttaatcattg gactattctt
     2221 ggttctccga gttggtatcc atctttgcat taaattaaag cacaccaaga aaagacagat
     2281 ttatacagac atagagatga accgacttgg aaagtaactc aaatcctgca caacagattc
     2341 ttcatgtttg gaccaaatca acttgtgata ccatgctcaa agaggcctca attatatttg
     2401 agtttttaat ttttatgaaa aaaaaaaaaa aaaacggaat tcctcgaggg atcttccata
     2461 cctaccagtt ctgcgcctgc aggtcgcggc cgatccaccg gatctagata actgatcata
     2521 atcagccata ccacatttgt agaggtttta cttgctttaa aaaacctccc acacctcccc
     2581 ctgaacctga aacataaaat gaatgcaatt gttgttgtta acttgtttat tgcagcttat
     2641 aatggttaca aataaagcaa tagcatcaca aatttcacaa ataaagcatt tttttcactg
     2701 cattctagtt gtggtttgtc caaactcatc aatgtatctt aacgcgtaaa ttgtaagcgt
     2761 taatattttg ttaaaattcg cgttaaattt ttgttaaatc agctcatttt ttaaccaata
     2821 ggccgaaatc ggcaaaatcc cttataaatc aaaagaatag accgagatag ggttgagtgt
     2881 tgttccagtt tggaacaaga gtccactatt aaagaacgtg gactccaacg tcaaagggcg
     2941 aaaaaccgtc tatcagggcg atggcccact acgtgaacca tcaccctaat caagtttttt
     3001 ggggtcgagg tgccgtaaag cactaaatcg gaaccctaaa gggagccccc gatttagagc
     3061 ttgacgggga aagccggcga acgtggcgag aaaggaaggg aagaaagcga aaggagcggg
     3121 cgctagggcg ctggcaagtg tagcggtcac gctgcgcgta accaccacac ccgccgcgct
     3181 taatgcgccg ctacagggcg cgtcaggtgg cacttttcgg ggaaatgtgc gcggaacccc
     3241 tatttgttta tttttctaaa tacattcaaa tatgtatccg ctcatgagac aataaccctg
     3301 ataaatgctt caataatatt gaaaaaggaa gagtcctgag gcggaaagaa ccagctgtgg
     3361 aatgtgtgtc agttagggtg tggaaagtcc ccaggctccc cagcaggcag aagtatgcaa
     3421 agcatgcatc tcaattagtc agcaaccagg tgtggaaagt ccccaggctc cccagcaggc
     3481 agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag tcagcaacca tagtcccgcc cctaactccg
     3541 cccatcccgc ccctaactcc gcccagttcc gcccattctc cgccccatgg ctgactaatt
     3601 ttttttattt atgcagaggc cgaggccgcc tcggcctctg agctattcca gaagtagtga
     3661 ggaggctttt ttggaggcct aggcttttgc aaagatcgat caagagacag gatgaggatc
     3721 gtttcgcatg attgaacaag atggattgca cgcaggttct ccggccgctt gggtggagag
     3781 gctattcggc tatgactggg cacaacagac aatcggctgc tctgatgccg ccgtgttccg
     3841 gctgtcagcg caggggcgcc cggttctttt tgtcaagacc gacctgtccg gtgccctgaa
     3901 tgaactgcaa gacgaggcag cgcggctatc gtggctggcc acgacgggcg ttccttgcgc
     3961 agctgtgctc gacgttgtca ctgaagcggg aagggactgg ctgctattgg gcgaagtgcc
     4021 ggggcaggat ctcctgtcat ctcaccttgc tcctgccgag aaagtatcca tcatggctga
     4081 tgcaatgcgg cggctgcata cgcttgatcc ggctacctgc ccattcgacc accaagcgaa
     4141 acatcgcatc gagcgagcac gtactcggat ggaagccggt cttgtcgatc aggatgatct
     4201 ggacgaagag catcaggggc tcgcgccagc cgaactgttc gccaggctca aggcgagcat
     4261 gcccgacggc gaggatctcg tcgtgaccca tggcgatgcc tgcttgccga atatcatggt
     4321 ggaaaatggc cgcttttctg gattcatcga ctgtggccgg ctgggtgtgg cggaccgcta
     4381 tcaggacata gcgttggcta cccgtgatat tgctgaagag cttggcggcg aatgggctga
     4441 ccgcttcctc gtgctttacg gtatcgccgc tcccgattcg cagcgcatcg ccttctatcg
     4501 ccttcttgac gagttcttct gagcgggact ctggggttcg aaatgaccga ccaagcgacg
     4561 cccaacctgc catcacgaga tttcgattcc accgccgcct tctatgaaag gttgggcttc
     4621 ggaatcgttt tccgggacgc cggctggatg atcctccagc gcggggatct catgctggag
     4681 ttcttcgccc accctagggg gaggctaact gaaacacgga aggagacaat accggaagga
     4741 acccgcgcta tgacggcaat aaaaagacag aataaaacgc acggtgttgg gtcgtttgtt
     4801 cataaacgcg gggttcggtc ccagggctgg cactctgtcg ataccccacc gagaccccat
     4861 tggggccaat acgcccgcgt ttcttccttt tccccacccc accccccaag ttcgggtgaa
     4921 ggcccagggc tcgcagccaa cgtcggggcg gcaggccctg ccatagcctc aggttactca
     4981 tatatacttt agattgattt aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc
     5041 ctttttgata atctcatgac caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca
     5101 gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc
     5161 tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta
     5221 ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt
     5281 ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc
     5341 gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg
     5401 ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg
     5461 tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag
     5521 ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc
     5581 agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat
     5641 agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg
     5701 gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc
     5761 tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt
     5821 accgccatgc at
//

质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
              收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
              1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
              加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
              6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
              将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
              挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
              四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
              穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

二、转化图片

P2043/pENTR223-CLTA人源基因质粒
P2057/pENTR223-C22orf23人源基因质粒
P2058/pENTR223-TMED3人源基因质粒
P2059/pENTR223-HEATR2-C13G人源基因质粒
P2060/pENTR223-TWSG1人源基因质粒
P2061/pENTR223-TMEM86B人源基因质粒
P2062/pENTR223-NUDCD3人源基因质粒
P2063/pENTR223-TRAPPC4人源基因质粒
P2064/pENTR223-GJB2人源基因质粒
P2065/pENTR223-GSTM4人源基因质粒
P2066/pENTR223-FAM119A人源基因质粒
P2067/pENTR223-PRELID1人源基因质粒
 

 

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