蛋白质标记服务

提供商 ：卡梅德生物科技（天津）有限公司

服务名称 ：蛋白质标记服务

规格 ：/

蛋白质标记服务

   蛋白标记技术是在蛋白上标记一些灵敏度高且易测定的物质，从而方便我们对感兴趣的蛋白质的丰度、相互作用、翻译后修饰、功能等问题进行研究。卡梅德生物拥有经验丰富的技术团队，积累了充足的蛋白标记经验，凭借成熟的标记技术和配套的仪器设备，可为客户提供高品质的蛋白质标记服务。
   卡梅德生物建立了一套完整的标记策略和计算方案，我们具有广泛的标签和结合物的选择，在拥有多种选择的基础上，为您提供合适的标签服务。根据客户的特定需求，能够为客户提供个性化解决方案，选择适合的标记物或标记方式，优化标记方法。我司主要可为客户提供蛋白酶标记、同位素标记、荧光标记、量子点标记、磁珠标记、PEG修饰等标记服务。

蛋白酶标记服务：
   蛋白标记服务中的酶标记物通常是指辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷脂酶（AP标记），这两种标记物常被用于标记抗体后用在ELISA检测。
   卡梅德生物采用的HRP和AP均来自sigma公司，根据丰富的蛋白定量经验，能够采用合理的方案将蛋白与酶的标记比例接近1:1，以获得准确的结果。此外，我们也为广大科研人员提供生物素标记服务。

类型	服务内容
HRP标记	* HRP由多个同功酶组成，分子量为40,000，等电点为PH 3-9，酶催化的适合PH因供氢体不同而稍有差异，但多在PH 5左右 * HRP较适用于快速显色反应，ELISA检测中加入底物5-10分钟内即可到达OD450值1.8-2.5左右
AP标记	* AP标记物较适用于慢速显色反应，显色时间约4-8个小时，催化形成的黄色化合物比较稳定，适合酶促动力学的定量检测
生物素（Biotin）标记	* 生物素既可以作为融合标签与目的蛋白进行重组表达，以便后续纯化和筛选工作，如进行噬菌体文库筛选时，其具有很高的筛选效率，同时也适用于IHC的组织特异性表达监测 * 蛋白进行生物素（Biotin）标记后，可以直接应用于IP，磁珠分选

蛋白同位素标记服务：
  蛋白同位素标记是经典的一种蛋白示踪和蛋白组学定量技术，与体外标记技术相比，同位素标记技术属于体内标记。
* 原理：用天然同位素(轻型)或稳定同位素 (重型)标记的必需氨基酸取代细胞培养基中相应氨基酸，细胞经5-6个倍增周期后，稳定同位素标记的氨基酸全部掺入到细胞新合成的蛋白质中替代了原有氨基酸。不同标记细胞的裂解蛋白按细胞数或蛋白量等比例混合，经分离、纯化后进行质谱鉴定，根据一级质谱图中两个同位素型肽段的面积比较进行相对定量。
   卡梅德生物自有蛋白表达平台结合我们的细胞培养平台，能够为客户提供13C，15N，15N-13C，35S和3H的蛋白同位素标记服务。 蛋白同位素标记服务也可以使用125I和131I，蛋白中的酪氨酸可通过 HPLC 或开管柱色谱（取决于碘化分子的特性）进行标记，并去除其中的游离碘，将放射性碘标记到蛋白和其他分子上，放射性碘用作示踪剂或探针。通常，使用 TLC 法检测标记产物，以保证游离碘的百分比<5%。

蛋白荧光标记服务：
   荧光染料标记蛋白/多肽技术是常见的蛋白体外标记技术，除了GFP，GYP等融合表达荧光蛋白之外，目标蛋白经过荧光染料标记可以直接进行活体示踪，细胞分选等。对于每一个需要标记的多肽或蛋白，我们技术人员会严格评估多肽或蛋白的物化性质，如多肽标记，linker长度，类型交联位置。卡梅德生物技术能够提供的荧光染料标记服务包括：

FITC、FAM、RBITC

胶体金标记Co-Au、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7

APC、PE

Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 594、Alexa Fluor 647

蛋白量子点标记服务：
  我们提供以无机结构ZnCdSe/ZnS为核心的量子点标记技术服务：
  羧基和氨基水溶性量子点（图A）：使用聚合物对油溶性量子点的表面修饰而得到，可以均匀的分散于水溶液中（如硼酸盐缓冲、PBS缓冲溶液等），表面羧基和氨基具有反应活性，粒径范围12~18nm。
  油溶性量子点（图B）：通过疏水配体对无机结构ZnCdSe/ZnS表面的包覆，量子点可以均匀的分散于非极性有机溶剂中（如己烷、甲苯、氯仿等），使其更容易进行加工。粒径范围5 ~10 nm，油溶性量子点通过封装后可以作为LED背光光源，增强显示色域；另外，对油溶性量子点进行表面修饰引入活性基团后，可以与生物分子进行偶联，应用于生物标记/检测、高通量编码、活体成像及动态示踪等领域。

蛋白磁珠标记服务：
  磁性纳米球（MNS）是以高分子聚合物为核，表面包覆有磁性纳米粒子、带有功能基团（羧基、氨基）的纳米球系列产品。该系列产品具有分散性好、磁响应快、表面功能基团丰富、偶联容易、分离简单等特点，可广泛应用于核酸纯化、蛋白纯化、亲和层析、细胞分选、免疫分析和临床诊断等多个生物医学领域。
蛋白PEG标记服务：
卡梅德生物提供不同分子量的PEG标记服务，具体详情请见蛋白PEG修饰服务。

服务优势

• 严格的质控体系，技能娴熟的实验技术人员，丰富的标记经验；
• 多种类型的标记物和标记方式可供选择；
• 成熟的技术路线，优化的实验流程，保证较高的蛋白标记成功率；
• 提高检测灵敏度，简化检测工作流程；
• 完整的上下游服务：可提供重组蛋白表达与制备、蛋白测序，蛋白标记修饰等一站式技术服务，节约客户宝贵时间和成本；
• 服务可定制：根据客户需求制备，为客户提供包括信息咨询，详细实验方案的设计与实施等相关服务

公司介绍：

  卡梅德生物科技（天津）有限公司作为国家高新技术企业，专注于为全球科学家和研究机构提供天然蛋白提取与发酵、重组蛋白定制表达服务，单、多克隆抗体开发，噬菌体文库构建与筛选服务；同时，基于我公司成熟的五大核心技术服务平台，成功研发了众多用于科学研究的重组蛋白、抗体、抗体药物靶点蛋白、工业酶、诊断原料等相关试剂。

核心平台：

---噬菌体抗体展示技术平台

  卡梅德生物科技有限公司利用自有的噬菌体（M13，T7噬菌体）展示技术平台，能够为客户提供高性价比的重组VHH抗体（纳米抗体/驼类纳米抗体）制备方案，包括动物免疫，文库建立，文库筛选以及重组抗体的体外表达等。

 

---抗体工程技术平台

  卡梅德生物科技的抗体工程平台包含单克隆抗体制备服务平台，多克隆抗体制备服务平台，抗体测序与改造平台。 单克隆抗体制备平台：基于杂交瘤技术的小鼠单抗技术平台，能够在2-3个月获得高亲和力与高特异性的单克隆抗体，同时基于噬菌体展示技术，我司能够制备多物种的重组单克隆抗体，包括小鼠，兔子，骆驼，羊驼以及人单抗。

  多克隆抗体制备服务平台：能够为客户提供兔多抗，羊多抗，骆驼类多抗，牛多抗等多物种的抗体制备服务，根据不同的抗原类型，来自卡梅德生物的抗体专家会为您量身定做适合您需求的方案，以满足您的项目要求并节省您的宝贵时间。

  抗体一级序列测序平台：为满足大量客户对抗体基因序列与氨基酸序列信息的需求，我们为客户提供De Novo抗体全长氨基酸序列解析和N端测序服务；同时我们设计积累多达80种杂交瘤抗体基因测序引物。

  抗体改造技术平台：卡梅德生物技术的抗体改造平台包括嵌合抗体制备，抗体亲和力成熟以及抗体人源化服务。目前我们已经成功制备十几例嵌合抗体与人源化抗体，均成功交付。

 

---蛋白表达与纯化服务技术平台

  卡梅德生物科技目前拥有四大蛋白表达平台，能为客户提供优质的蛋白表达技术服务。

  哺乳动物表达平台： 目前公司拥有Freestyle CHO，Expi CHO，CHO-DG44，HEK293F，Vero等细胞系用于蛋白表达制备。公司秉承质量优先原则，全部统一采用Gibco细胞培养基和相关转染配套试剂，以保证每个批次的哺乳动物细胞蛋白表达产品高质量、高表达水平的交付。同时公司拥有的表达载体体系，相比市面常用蛋白表达载体，能够为客户提供更高纯度的蛋白。

  昆虫细胞表达平台：目前公司常采用的昆虫表达细胞为SF9，配套使用的是来自Gibco的培养基，只为更快、更好地为客户提供高质量的产品。利用该蛋白表达平台，我们已经成功制备了多种人源跨膜蛋白，包括多种GPCR家族成员蛋白。

  原核蛋白表达平台：大肠杆菌（E.coli）重组蛋白表达技术经过多年的发展，已经积累了很多的经验。但如果要在大肠杆菌表达体系获得不错的可溶以及高产量的蛋白表达，一个全方位设计的表达策略必不可少。卡梅德生物科技的专家团队在蛋白表达和抗体制备方面具有丰富的经验和知识储备，针对每位客户的需求，我们的都会提供具体的方案设计。

  酵母蛋白表达平台：毕赤酵母，酿酒酵母等蛋白表达体系，适用于需要真核表达蛋白，同时兼具产量与性价比的项目需求特点。

  植物表达平台：为了提供更好的服务，卡梅德生物携手国内重点科研单位共同为客户提供基因烟草瞬时转染技术的植物蛋白表达服务，项目从设计构建到蛋白表达只需要4-6周。该技术平台能够为客户在较短的时间内获得高纯度，高质量的植物来源的蛋白，已解决大部分植物蛋白在上述几大蛋白表达系统中不溶或不表达的难题。

---蛋白批量发酵平台

  超高密度发酵技术：卡梅德生物科技能够为客户提供5L，10L,30L，80L体积的贴壁细胞高密度发酵技术服务（微载体贴壁培养技术），人源细胞贴壁细胞培养密度高达4x106个/ml，适用于病毒转染类型的蛋白高产量表达发酵，能够做到1g/L发酵水平。利用该技术平台，我们目前完成的重组抗体发酵表达记录高达4.7g/L发酵水平。

  同时，借助有氧发酵技术，我们能够为客户提供原核和酵母的超高密度发酵服务，采用有氧发酵类型的原核发酵技术，蛋白产量比传统的原核发酵要高（相差接近100倍蛋白产量和得率）。

---蛋白纯化技术平台：

  我司分别配制了Akta和BioRad Biological的蛋白纯化仪，同时拥有GE全套填料，包括Sphedax 75/200,500, G25,G100，CMFF,Q-FF，DEAE以及不同规格的预装柱等，能够在1-2周内为客户完成一套蛋白纯化的工艺开发小试方案。我司的科研团队成员均来自国内生物制药企业，硕士博士学历占比98%，因此有能力为客户提供快速，高质量天然蛋白和跨膜蛋白的纯化等优质服务。

 

---稳定细胞系筛选平台与基础分子生物平台

  稳定细胞系构建平台：卡梅德生物可为客户定制不同类型的稳定细胞系构建与筛选服务，如利用Crisper/Cas9的多物种、多细胞系来源的细胞沉默，敲除，过表达等稳定细胞系；同时我们也为客户提供基于电转或脂质体转染（Lipofectin2000/3000）的稳定转染细胞系构建服务，如CHO细胞蛋白高表达细胞株等。

  卡梅德生物的基础分子生物学平台承担了包括基因克隆，蛋白定量，免疫印迹检测（SDS-PAGE、WB），宿主核酸检测，蛋白抗体亲和纯化，ELISA操作，内毒素检测，HPLC分析，免疫组化，IP，免疫浊度，流式细胞术等服务。