pSV-Beta-Gal乳糖苷酶质粒价格_品牌:Xybio-丁香通官网

保存条件：-20

保质期：2年

英文名：pSV-β-gal

库存：100

供应商：上海烜雅生物科技有限公司

CAS号：/

规格：干粉/液体

基本信息
名称：pSV-Beta-Gal乳糖苷酶质粒
别称: pSV-β-gal;

启动子:	SV40
复制子:	pUC
终止子:	SV40 poly（A） signal
质粒分类:	哺乳细胞载体;蛋白过表达质粒
质粒大小:	6820bp
质粒标签:	LacZ
原核抗性:	Amp
筛选标记:	LacZ
克隆菌株:	DH5a
培养条件:	37度
表达宿主:	哺乳细胞
培养条件:	37℃，有氧，LB
诱导方式:	无需诱导，瞬时表达
5'测序引物:	根据序列设计
3'测序引物:	根据序列设计

质粒属性

载体宿主：	哺乳细胞
载体用途：	蛋白表达
基因种属：
基因类型：	ORF
原核抗性：	Amp
真核抗性：
荧光蛋白：	LacZ

质粒简介

质粒图谱

质粒序列
LOCUS       Exported                6820 bp ds-DNA     circular SYN 28-六月-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION   .
VERSION     .
KEYWORDS    pSV-beta-gal
SOURCE      synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE   1 (bases 1 to 6820)
AUTHORS   .
TITLE     Direct Submission
JOURNAL   Exported 2016年9月18日 from SnapGene Viewer 2.8.1
            http://www.miaolingbio.com
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..6820
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     promoter        56..413
                     /note="SV40 promoter"
                     /note="SV40 enhancer and early promoter"
     rep_origin      264..399
                     /note="SV40 ori"
                     /note="SV40 origin of replication"
     CDS             710..3757
                     /codon_start=1
                     /gene="lacZ"
                     /product="beta-galactosidase"
                     /note="beta-galactosidase"
                     /translation="VVLQRRDWENPGVTQLNRLAAHPPFASWRNSEEARTDRPSQQLRS
                     LNGEWRFAWFPAPEAVPESWLECDLPEADTVVVPSNWQMHGYDAPIYTNVTYPITVNPP
                     FVPTENPTGCYSLTFNVDESWLQEGQTRIIFDGVNSAFHLWCNGRWVGYGQDSRLPSEF
                     DLSAFLRAGENRLAVMVLRWSDGSYLEDQDMWRMSGIFRDVSLLHKPTTQISDFHVATR
                     FNDDFSRAVLEAEVQMCGELRDYLRVTVSLWQGETQVASGTAPFGGEIIDERGGYADRV
                     TLRLNVENPKLWSAEIPNLYRAVVELHTADGTLIEAEACDVGFREVRIENGLLLLNGKP
                     LLIRGVNRHEHHPLHGQVMDEQTMVQDILLMKQNNFNAVRCSHYPNHPLWYTLCDRYGL
                     YVVDEANIETHGMVPMNRLTDDPRWLPAMSERVTRMVQRDRNHPSVIIWSLGNESGHGA
                     NHDALYRWIKSVDPSRPVQYEGGGADTTATDIICPMYARVDEDQPFPAVPKWSIKKWLS
                     LPGETRPLILCEYAHAMGNSLGGFAKYWQAFRQYPRLQGGFVWDWVDQSLIKYDENGNP
                     WSAYGGDFGDTPNDRQFCMNGLVFADRTP-HPALTEAKHQQQFFQFRLSGQTIEVTSEYL
                     FRHSDNELLHWMVALDGKPLASGEVPLDVAPQGKQLIELPELPQPESAGQLWLTVRVVQ
                     PNATAWSEAGHISAWQQWRLAENLSVTLPAASHAIPHLTTSEMDFCIELGNKRWQFNRQ
                     SGFLSQMWIGDKKQLLTPLRDQFTRAPLDNDIGVSEATRIDPNAWVERWKAAGHYQAEA
                     ALLQCTADTLADAVLITTAHAWQHQGKTLFISRKTYRIDGSGQMAITVDVEVASDTP-HP
                     ARIGLNCQLAQVAERVNWLGLGPQENYPDRLTAACFDRWDLPLS-DMYTPYVFPSENGLR
                     CGTRELNYGPHQWRGDFQFNISRYSQQQLMETSHRHLLHAEEGTWLNIDGFHMGIGGDD
                     SWSPSVSAEFQLSAGRYHYQLVWCQK"
     polyA_signal    4021..4155
                     /note="SV40 poly(A) signal"
                     /note="SV40 polyadenylation signal"
     primer_bind     complement(4189..4205)
                     /note="M13 fwd"
                     /note="common sequencing primer, one of multiple similar
                     variants"
     promoter        4679..4783
                     /gene="bla"
                     /note="AmpR promoter"
     CDS             4784..5644
                     /codon_start=1
                     /gene="bla"
                     /product="beta-lactamase"
                     /note="AmpR"
                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                     related antibiotics"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                     LIKHW"
     rep_origin      5815..6403
                     /direction=RIGHT
                     /note="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
     protein_bind    6691..6712
                     /bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
                     /note="CAP binding site"
                     /note="CAP binding activates transcription in the presence
                     of cAMP."
     promoter        6727..6757
                     /note="lac promoter"
                     /note="promoter for the E. coli lac operon"
     protein_bind    6765..6781
                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
                     /note="lac operator"
                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to
                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
                     relieved by adding lactose or
                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
     primer_bind     6789..6805
                     /note="M13 rev"
                     /note="common sequencing primer, one of multiple similar
                     variants"
ORIGIN
        1 gcgcagcacc atggcctgaa ataacctctg aaagaggaac ttggttaggt accttctgag
       61 gcggaaagaa ccagctgtgg aatgtgtgtc agttagggtg tggaaagtcc ccaggctccc
      121 cagcaggcag aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccagg tgtggaaagt
      181 ccccaggctc cccagcaggc agaagtatgc aaagcatgca tctcaattag tcagcaacca
      241 tagtcccgcc cctaactccg cccatcccgc ccctaactcc gcccagttcc gcccattctc
      301 cgccccatgg ctgactaatt ttttttattt atgcagaggc cgaggccgcc tcggcctctg
      361 agctattcca gaagtagtga ggaggctttt ttggaggcct aggcttttgc aaaaagcttg
      421 ggatctctat aatctcgcgc aacctatttt cccctcgaac actttttaag ccgtagataa
      481 acaggctggg acacttcaca tgagcgaaaa atacatcgtc acctgggaca tgttgcagat
      541 ccatgcacgt aaactcgcaa gccgactgat gccttctgaa caatggaaag gcattattgc
      601 cgtaagccgt ggcggtctgg taccggtggg tgaagaccag aaacagcacc tcgaactgag
      661 ccgcgatatt gcccagcgtt tcaacgcgct gtatggcgag atcgatcccg tcgttttaca
      721 acgtcgtgac tgggaaaacc ctggcgttac ccaacttaat cgccttgcag cacatccccc
      781 tttcgccagc tggcgtaata gcgaagaggc ccgcaccgat cgcccttccc aacagttgcg
      841 cagcctgaat ggcgaatggc gctttgcctg gtttccggca ccagaagcgg tgccggaaag
      901 ctggctggag tgcgatcttc ctgaggccga tactgtcgtc gtcccctcaa actggcagat
      961 gcacggttac gatgcgccca tctacaccaa cgtgacctat cccattacgg tcaatccgcc
     1021 gtttgttccc acggagaatc cgacgggttg ttactcgctc acatttaatg ttgatgaaag
     1081 ctggctacag gaaggccaga cgcgaattat ttttgatggc gttaactcgg cgtttcatct
     1141 gtggtgcaac gggcgctggg tcggttacgg ccaggacagt cgtttgccgt ctgaatttga
     1201 cctgagcgca tttttacgcg ccggagaaaa ccgcctcgcg gtgatggtgc tgcgctggag
     1261 tgacggcagt tatctggaag atcaggatat gtggcggatg agcggcattt tccgtgacgt
     1321 ctcgttgctg cataaaccga ctacacaaat cagcgatttc catgttgcca ctcgctttaa
     1381 tgatgatttc agccgcgctg tactggaggc tgaagttcag atgtgcggcg agttgcgtga
     1441 ctacctacgg gtaacagttt ctttatggca gggtgaaacg caggtcgcca gcggcaccgc
     1501 gcctttcggc ggtgaaatta tcgatgagcg tggtggttat gccgatcgcg tcacactacg
     1561 tctgaacgtc gaaaacccga aactgtggag cgccgaaatc ccgaatctct atcgtgcggt
     1621 ggttgaactg cacaccgccg acggcacgct gattgaagca gaagcctgcg atgtcggttt
     1681 ccgcgaggtg cggattgaaa atggtctgct gctgctgaac ggcaagccgt tgctgattcg
     1741 aggcgttaac cgtcacgagc atcatcctct gcatggtcag gtcatggatg agcagacgat
     1801 ggtgcaggat atcctgctga tgaagcagaa caactttaac gccgtgcgct gttcgcatta
     1861 tccgaaccat ccgctgtggt acacgctgtg cgaccgctac ggcctgtatg tggtggatga
     1921 agccaatatt gaaacccacg gcatggtgcc aatgaatcgt ctgaccgatg atccgcgctg
     1981 gctaccggcg atgagcgaac gcgtaacgcg aatggtgcag cgcgatcgta atcacccgag
     2041 tgtgatcatc tggtcgctgg ggaatgaatc aggccacggc gctaatcacg acgcgctgta
     2101 tcgctggatc aaatctgtcg atccttcccg cccggtgcag tatgaaggcg gcggagccga
     2161 caccacggcc accgatatta tttgcccgat gtacgcgcgc gtggatgaag accagccctt
     2221 cccggctgtg ccgaaatggt ccatcaaaaa atggctttcg ctacctggag agacgcgccc
     2281 gctgatcctt tgcgaatacg cccacgcgat gggtaacagt cttggcggtt tcgctaaata
     2341 ctggcaggcg tttcgtcagt atccccgttt acagggcggc ttcgtctggg actgggtgga
     2401 tcagtcgctg attaaatatg atgaaaacgg caacccgtgg tcggcttacg gcggtgattt
     2461 tggcgatacg ccgaacgatc gccagttctg tatgaacggt ctggtctttg ccgaccgcac
     2521 gccgcatcca gcgctgacgg aagcaaaaca ccagcagcag tttttccagt tccgtttatc
     2581 cgggcaaacc atcgaagtga ccagcgaata cctgttccgt catagcgata acgagctcct
     2641 gcactggatg gtggcgctgg atggtaagcc gctggcaagc ggtgaagtgc ctctggatgt
     2701 cgctccacaa ggtaaacagt tgattgaact gcctgaacta ccgcagccgg agagcgccgg
     2761 gcaactctgg ctcacagtac gcgtagtgca accgaacgcg accgcatggt cagaagccgg
     2821 gcacatcagc gcctggcagc agtggcgtct ggcggaaaac ctcagtgtga cgctccccgc
     2881 cgcgtcccac gccatcccgc atctgaccac cagcgaaatg gatttttgca tcgagctggg
     2941 taataagcgt tggcaattta accgccagtc aggctttctt tcacagatgt ggattggcga
     3001 taaaaaacaa ctgctgacgc cgctgcgcga tcagttcacc cgtgcaccgc tggataacga
     3061 cattggcgta agtgaagcga cccgcattga ccctaacgcc tgggtcgaac gctggaaggc
     3121 ggcgggccat taccaggccg aagcagcgtt gttgcagtgc acggcagata cacttgctga
     3181 tgcggtgctg attacgaccg ctcacgcgtg gcagcatcag gggaaaacct tatttatcag
     3241 ccggaaaacc taccggattg atggtagtgg tcaaatggcg attaccgttg atgttgaagt
     3301 ggcgagcgat acaccgcatc cggcgcggat tggcctgaac tgccagctgg cgcaggtagc
     3361 agagcgggta aactggctcg gattagggcc gcaagaaaac tatcccgacc gccttactgc
     3421 cgcctgtttt gaccgctggg atctgccatt gtcagacatg tataccccgt acgtcttccc
     3481 gagcgaaaac ggtctgcgct gcgggacgcg cgaattgaat tatggcccac accagtggcg
     3541 cggcgacttc cagttcaaca tcagccgcta cagtcaacag caactgatgg aaaccagcca
     3601 tcgccatctg ctgcacgcgg aagaaggcac atggctgaat atcgacggtt tccatatggg
     3661 gattggtggc gacgactcct ggagcccgtc agtatcggcg gaattccagc tgagcgccgg
     3721 tcgctaccat taccagttgg tctggtgtca aaaataataa taaccgggca ggccatgtct
     3781 gcccgtattt cgcgtaagga aatccattat gtactattta aaaaacacaa acttttggat
     3841 gttcggttta ttctttttct tttacttttt tatcatggga gcctacttcc cgtttttccc
     3901 gatttggcta catgacatca accatatcag caaaagtgat acgggtatta tttttgccgc
     3961 tatttctctg ttctcgctat tattccaacc gctgtttggt ctgctttctg acaaactcgg
     4021 aacttgttta ttgcagctta taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca
     4081 aataaagcat ttttttcact gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct
     4141 tatcatgtct ggatcctcta gagtcgacct gcaggcatgc aagctggcac tggccgtcgt
     4201 tttacaacgt cgtgactggg aaaaccctgg cgttacccaa cttaatcgcc ttgcagcaca
     4261 tccccctttc gccagctggc gtaatagcga agaggcccgc accgatcgcc cttcccaaca
     4321 gttgcgcagc ctgaatggcg aatggcgcct gatgcggtat tttctcctta cgcatctgtg
     4381 cggtatttca caccgcatat ggtgcactct cagtacaatc tgctctgatg ccgcatagtt
     4441 aagccagccc cgacacccgc caacacccgc tgacgcgccc tgacgggctt gtctgctccc
     4501 ggcatccgct tacagacaag ctgtgaccgt ctccgggagc tgcatgtgtc agaggttttc
     4561 accgtcatca ccgaaacgcg cgagacgaaa gggcctcgtg atacgcctat ttttataggt
     4621 taatgtcatg ataataatgg tttcttagac gtcaggtggc acttttcggg gaaatgtgcg
     4681 cggaacccct atttgtttat ttttctaaat acattcaaat atgtatccgc tcatgagaca
     4741 ataaccctga taaatgcttc aataatattg aaaaaggaag agtatgagta ttcaacattt
     4801 ccgtgtcgcc cttattccct tttttgcggc attttgcctt cctgtttttg ctcacccaga
     4861 aacgctggtg aaagtaaaag atgctgaaga tcagttgggt gcacgagtgg gttacatcga
     4921 actggatctc aacagcggta agatccttga gagttttcgc cccgaagaac gttttccaat
     4981 gatgagcact tttaaagttc tgctatgtgg cgcggtatta tcccgtattg acgccgggca
     5041 agagcaactc ggtcgccgca tacactattc tcagaatgac ttggttgagt actcaccagt
     5101 cacagaaaag catcttacgg atggcatgac agtaagagaa ttatgcagtg ctgccataac
     5161 catgagtgat aacactgcgg ccaacttact tctgacaacg atcggaggac cgaaggagct
     5221 aaccgctttt ttgcacaaca tgggggatca tgtaactcgc cttgatcgtt gggaaccgga
     5281 gctgaatgaa gccataccaa acgacgagcg tgacaccacg atgcctgtag caatggcaac
     5341 aacgttgcgc aaactattaa ctggcgaact acttactcta gcttcccggc aacaattaat
     5401 agactggatg gaggcggata aagttgcagg accacttctg cgctcggccc ttccggctgg
     5461 ctggtttatt gctgataaat ctggagccgg tgagcgtggg tctcgcggta tcattgcagc
     5521 actggggcca gatggtaagc cctcccgtat cgtagttatc tacacgacgg ggagtcaggc
     5581 aactatggat gaacgaaata gacagatcgc tgagataggt gcctcactga ttaagcattg
     5641 gtaactgtca gaccaagttt actcatatat actttagatt gatttaaaac ttcattttta
     5701 atttaaaagg atctaggtga agatcctttt tgataatctc atgaccaaaa tcccttaacg
     5761 tgagttttcg ttccactgag cgtcagaccc cgtagaaaag atcaaaggat cttcttgaga
     5821 tccttttttt ctgcgcgtaa tctgctgctt gcaaacaaaa aaaccaccgc taccagcggt
     5881 ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac tctttttccg aaggtaactg gcttcagcag
     5941 agcgcagata ccaaatactg ttcttctagt gtagccgtag ttaggccacc acttcaagaa
     6001 ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg ttaccagtgg ctgctgccag
     6061 tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga tagttaccgg ataaggcgca
     6121 gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc ttggagcgaa cgacctacac
     6181 cgaactgaga tacctacagc gtgagctatg agaaagcgcc acgcttcccg aagggagaaa
     6241 ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga gagcgcacga gggagcttcc
     6301 agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt cgccacctct gacttgagcg
     6361 tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg aaaaacgcca gcaacgcggc
     6421 ctttttacgg ttcctggcct tttgctggcc ttttgctcac atgttctttc ctgcgttatc
     6481 ccctgattct gtggataacc gtattaccgc ctttgagtga gctgataccg ctcgccgcag
     6541 ccgaacgacc gagcgcagcg agtcagtgag cgaggaagcg gaagagcgcc caatacgcaa
     6601 accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga
     6661 ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat taatgtgagt tagctcactc attaggcacc
     6721 ccaggcttta cactttatgc ttccggctcg tatgttgtgt ggaattgtga gcggataaca
     6781 atttcacaca ggaaacagct atgacatgat tacgaattcg
//

质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
              ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
              ③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
              ④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
              ⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
              ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
              四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。

二、转化图片