CHO-S 仓鼠卵巢细胞（暂不供应）价格_品牌:PriCells（原生原代）-丁香通官网

英文名：-

CAS号：-

库存：大量供应

细胞类型：-

品系：细胞系

组织来源：-

相关疾病：-

物种来源：-

免疫类型：-

细胞形态：详情见说明书

器官来源：-

运输方式：常温/干冰

年限：长期

生长状态：良好

规格：1×10^6细胞数/1ml

细胞介绍
贴壁生长及悬浮生长均可（用于蛋白表达时，应使用悬浮生长状态，此时细胞生长状态更好，比表面积更高，生物反应器中的传质、传热效率更高，同时也可提高生物反应器空间使用效率。工业上大规模生产单抗，重组蛋白，大部分使用悬浮培养法来生产）

细胞特性
1）来源：中国仓鼠
2）形态：成纤维细胞样
3）含量：>1x10^6 个/mL
4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；

（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。

（3）具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供科研使用。

细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）培养基信息：EX-CELL CD-CHO CHO Serum-free Medium,Chemically Defined(Sigma-Aldrich,货号：24361C)
添加物：
L-谷氨酰胺（Sigma-Aldrich,货号：G8540-25G）
Anti-Clumping Agent(Gibco，货号：01-0057AE)
备注：CD-CHO CHO Serum-free Medium请按照培养基配制说明书配制，L-谷氨酰胺配制浓度为200mM，工作浓度为8mM（即稀释25倍，如500ml CHO Serum-free Medium 中添加20ml 200mM L-谷氨酰胺，抗结团剂使用为1%，即500ml CHO Serum-free Medium 中添加5ml 抗结团剂）
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
传代、转染、建库及实验室规模小试方法：
赛百慷提供的CHO-S细胞为已驯化的细胞，具有良好的适应悬浮生长及适应无血清培养基生长特性。
传代方法：
1.10cm皿中培养：使用计数器（计数器或者血球计数板计数）计数，接种密度为3×105个细胞/ml接种于提前37℃预热的新鲜培养基中（建议培养基取7-8ml，此时细胞生长状态较好），置于摇床上生长，转速为120-130rpm，湿度为70-80%，5%二氧化碳，温度为37℃。
2.培养约2-3天，细胞密度达到1×106个活细胞/ml时，应1000rpm，25℃离心5min，离心后计数（此时应稀释），然后接种密度为3×105个细胞/ml接种于提前37℃预热的新鲜培养基中。细胞数目足够时，可冻存。
也可选择125ml或者250ml摇瓶中培养细胞。（注意细胞培养液体积一般在总体积的五分之一，如在125ml摇瓶中加入25ml培养物，应注意在摇瓶中培养细胞时应将瓶盖稍微拧松，以便于气体交换，同时也不宜拧得过松，防止细胞污染）
转染方法：
在连续5代细胞密度未超过2×106个活细胞/ml时，可以使用FreeStyle Max转染试剂（Gibco，货号：16447）在CD CHO Serum-free Medium中直接转染。（注意：Anti-Clumping Agent会干扰FreeStyle Max转染试剂转染效率，同时也会干扰其他脂质体型转染试剂的转染效率）
建库方法：
若需要建库，可将细胞接种于125ml摇瓶中（接种密度为3×105个细胞/ml，总体积为25ml），此方法同样适用于稳定表达所需要蛋白的细胞株的建库工作。建库时，需要先建初级库（master bank）（一般为10支，每支细胞总数不少于4.5×107个细胞），此步骤结束后，从冻存的初级库中取出一支复苏，按照同样步骤建次级库（working bank）（相同的，一般为10支，每支细胞总数不少于4.5×107个细胞）。
实验室规模小试方法：
将挑选出的稳定细胞株从96孔板到24孔板到6孔板到10cm皿中逐级扩大培养后（此时需要注意在培养过程中应及时保种，以防止后续步骤出现污染，及应对可能的表达量衰退现象）以3×105个细胞/ml接种于125ml摇瓶中，转速为120-130rpm，温度为37℃，湿度为70-80%，连续培养一周，每天取样做出相应的细胞生长曲线，细胞活率曲线，蛋白表达曲线，可根据实际情况，每天取样测出培养基中葡萄糖含量，以便决定是否需要补加葡萄糖，同时可使用CHO Feed Bioreactor Supplement作为细胞发酵中补料，同时做出相应的细胞生长曲线，细胞活率曲线，蛋白表达曲线，为中试放大补料添加做出合理数据支持。

1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

武汉原生原代生物医药科技有限公司（原生原代，PriCells）于2009年成立。位于湖北省武汉市东湖高新技术开发区东湖国家自主创新示范区域，总部设立在武汉国家生物产业基地（即光谷生物城——光谷智慧健康园。

作为中国专业的、专注的研发--生产--销售多种属组织源性细胞产品和提供细胞检测技术服务的生物医药企业，率先独立起草和制定了“基于多种属组织源性细胞分离、培养、运输和检测的PriCells技术流程”的行业专业标准，已被国际权威学术机构认可，被中国的学术机构和企业单位广泛应用。研发和生产的细胞产品主要面向科研院所、生物技术公司、制药企业研发中心和临床医疗机构。

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