pCAG-GBP6-10gly-VPminx4基因质粒

pCAG-GBP6-10gly-VPminx4基因质粒

价格: ¥100 - 1000

品牌:Xybio

货号:P1888

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产品详情

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保存条件 :-20

保质期 :2年

英文名 :Plasmid#50796

库存 :100

供应商 :上海烜雅生物科技有限公司

CAS号 :/

规格 :干粉/液体

基本信息
名称:pCAG-GBP6-10gly-VPminx4基因质粒
别称: Plasmid#50796
启动子:CMV
复制子: pUC
质粒大小:6630bp
质粒标签:N-HA
原核抗性: Amp
筛选标记:G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度

质粒属性
载体宿主:哺乳细胞
载体用途:蛋白表达
基因种属:
基因类型:ORF
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光蛋白:

质粒简介
 pCAG-GBP6-10gly-VPminx4质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供

质粒图谱


质粒序列:详询


质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
              收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
              1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
              加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
              6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
              将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
              挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
              四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
              穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

二、转化图片

P4942/pECMV-3×FLAG-METTL14人源基因质粒
P4961/pLVML-Myc-KBTBD6-IRES-Puro人源基因质粒
P4955/pCMV-HA-MICALL2(2同义突变)人源基因质粒
P4956/pECMV-3×FLAG-METTL3(1同义突变)人源基因质粒
P1169/pECMV-3×FLAG-H-FABP人源基因质粒
P1170/pECMV-3×FLAG-TRAF6-S12F人源基因质粒
P1171/pECMV-3×FLAG-GSK3B人源基因质粒
P1172/pECMV-3×FLAG-CD1D人源基因质粒
P1719/pECMV-3×FLAG-CD4人源基因质粒
P1830/pECMV-3×FLAG-CD22人源基因质粒
P1195/pECMV-3×FLAG-AFP人源基因质粒
 

 

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