p14-9VNA5人源基因质粒价格_品牌:Xybio-丁香通官网

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保质期：2年

英文名：NM_003133.5

库存：100

供应商：上海烜雅生物科技有限公司

CAS号：/

规格：干粉/液体

基本信息
名称：p14-9VNA5人源基因质粒
别称: NM_003133.5
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度

质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：

质粒简介
p14-9VNA5-SRP14-SRP9是一个哺乳细胞BIFC人源基因验证质粒。

质粒图谱

质粒序列
LOCUS Exported 5879 bp ds-DNA circular SYN 05-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5879
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
enhancer 318..697
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 698..901
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 935..958
/codon_start=1
/product="FLAG(R) epitope tag, followed by an enterokinase
cleavage site"
/label=FLAG
/translation="DYKDDDDK"
misc_feature 977..1384
/label=SRP14mut
/note="Amino acids 96-100 of SRP14 changed to alanine"
misc_feature 1397..1654
/label=SRP9
CDS 1691..2209
/codon_start=1
/product="N-terminal fragment of mVenus for use in
bimolecular fluorescence complementation (BiFC) (Kodama and
Hu, 2010)"
/label=VN173
/translation="MVSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTL
KLICTTGKLPVPWPTLVTTLGYGLQCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDD
GNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNYNSHNVYITADKQKNGIK
ANFKIRHNIE"
polyA_signal 2220..2842
/label=hGH poly(A) signal
/note="human growth hormone polyadenylation signal"
promoter 2871..3200
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 3051..3186
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
rep_origin complement(3673..4261)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(4432..5292)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5293..5397)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
rep_origin 5424..5879
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
ORIGIN
1 ccattcgcca ttcaggctgc gcaactgttg ggaagggcga tcggtgcggg cctcttcgct
61 attacgccag ctggcgaaag ggggatgtgc tgcaaggcga ttaagttggg taacgccagg
121 gttttcccag tcacgacgtt gtaaaacgac ggccagtgcc aagctgatct atacattgaa
181 tcaatattgg caattagcca tattagtcat tggttatata gcataaatca atattggcta
241 ttggccattg catacgttgt atctatatca taatatgtac atttatattg gctcatgtcc
301 aatatgaccg ccatgttgac attgattatt gactagttat taatagtaat caattacggg
361 gtcattagtt catagcccat atatggagtt ccgcgttaca taacttacgg taaatggccc
421 gcctggctga ccgcccaacg acccccgccc attgacgtca ataatgacgt atgttcccat
481 agtaacgcca atagggactt tccattgacg tcaatgggtg gagtatttac ggtaaactgc
541 ccacttggca gtacatcaag tgtatcatat gccaagtccg ccccctattg acgtcaatga
601 cggtaaatgg cccgcctggc attatgccca gtacatgacc ttacgggact ttcctacttg
661 gcagtacatc tacgtattag tcatcgctat taccatggtg atgcggtttt ggcagtacac
721 caatgggcgt ggatagcggt ttgactcacg gggatttcca agtctccacc ccattgacgt
781 caatgggagt ttgttttggc accaaaatca acgggacttt ccaaaatgtc gtaataaccc
841 cgccccgttg acgcaaatgg gcggtaggcg tgtacggtgg gaggtctata taagcagagc
901 tcgtttagtg aaccgtcaga attgatctac catggactac aaagacgatg acgacaagct
961 tgcggccgcg aattctatgg tgttgttgga gagcgagcag ttcctgacgg agctgaccag
1021 acttttccag aagtgtcgga cgtcgggcag cgtctatatc accttgaaga agtatgacgg
1081 tcgaaccaaa cccattccaa agaaaggtac tgtggagggc tttgagcccg cagacaacaa
1141 gtgtctgtta agagctaccg atgggaagaa gaagatcagc actgtggtga gctccaagga
1201 agtgaataag tttcagatgg cttattcaaa cctccttaga gctaacatgg atgggttgaa
1261 ggcagcagca gcagcaaaca aaactaagaa gaccaaagca gcagcaacag cagcagcagc
1321 agcacctgcc gcagcagcaa cagcagcaac aacagcagca acaacagcag caacagcagc
1381 acagtccccc gggggaatgc cgcagtacca gacctgggag gagttcagcc gcgctgccga
1441 gaagctttac ctcgctgacc ctatgaaggc acgtgtggtt ctcaaatata ggcattctga
1501 tgggaacttg tgtgttaaag caacagatga tttagtttgt ttggtgtata aaacagacca
1561 agctcaagat gtaaagaaga ttgagaaatt ccacagtcaa ctaatgcgac ttatggtagc
1621 caaggaagcc cgcaatgtta ccatggaaac tgagggggta ccagtcgact ctagaagatc
1681 catcgccacc atggtgagca agggcgagga gctgttcacc ggggtggtgc ccatcctggt
1741 cgagctggac ggcgacgtaa acggccacaa gttcagcgtg tccggcgagg gcgagggcga
1801 tgccacctac ggcaagctga ccctgaagct gatctgcacc accggcaagc tgcccgtgcc
1861 ctggcccacc ctcgtgacca ccctgggcta cggcctgcag tgcttcgccc gctaccccga
1921 ccacatgaag cagcacgact tcttcaagtc cgccatgccc gaaggctacg tccaggagcg
1981 caccatcttc ttcaaggacg acggcaacta caagacccgc gccgaggtga agttcgaggg
2041 cgacaccctg gtgaaccgca tcgagctgaa gggcatcgac ttcaaggagg acggcaacat
2101 cctggggcac aagctggagt acaactacaa cagccacaac gtctatatca ccgccgacaa
2161 gcagaagaac ggcatcaagg ccaacttcaa gatccgccac aacatcgagt agggatcccg
2221 ggtggcatcc ctgtgacccc tccccagtgc ctctcctggc cctggaagtt gccactccag
2281 tgcccaccag ccttgtccta ataaaattaa gttgcatcat tttgtctgac taggtgtcct
2341 tctataatat tatggggtgg aggggggtgg tatggagcaa ggggcaagtt gggaagacaa
2401 cctgtagggc ctgcggggtc tattgggaac caagctggag tgcagtggca caatcttggc
2461 tcactgcaat ctccgcctcc tgggttcaag cgattctcct gcctcagcct cccgagttgt
2521 tgggattcca ggcatgcatg accaggctca gctaattttt gtttttttgg tagagacggg
2581 gtttcaccat attggccagg ctggtctcca actcctaatc tcaggtgatc tacccacctt
2641 ggcctcccaa attgctggga ttacaggcgt gaaccactgc tcccttccct gtccttctga
2701 ttttaaaata actataccag caggaggacg tccagacaca gcataggcta cctggccatg
2761 cccaaccggt gggacatttg agttgcttgc ttggcactgt cctctcatgc gttgggtcca
2821 ctcagtagat gcctgttgaa ttgggtacgc ggccagcttg gctgtggaat gtgtgtcagt
2881 tagggtgtgg aaagtcccca ggctccccag caggcagaag tatgcaaagc atgcatctca
2941 attagtcagc aaccaggtgt ggaaagtccc caggctcccc agcaggcaga agtatgcaaa
3001 gcatgcatct caattagtca gcaaccatag tcccgcccct aactccgccc atcccgcccc
3061 taactccgcc cagttccgcc cattctccgc cccatggctg actaattttt tttatttatg
3121 cagaggccga ggccgcctcg gcctctgagc tattccagaa gtagtgagga ggcttttttg
3181 gaggcctagg cttttgcaaa aagctcctcg aggaactgaa aaaccagaaa gttaattccc
3241 tatagtgagt cgtattaaat tcgtaatcat gtcatagctg tttcctgtgt gaaattgtta
3301 tccgctcaca attccacaca acatacgagc cggaagcata aagtgtaaag cctggggtgc
3361 ctaatgagtg agctaactca cattaattgc gttgcgctca ctgcccgctt tccagtcggg
3421 aaacctgtcg tgccagctgc attaatgaat cggccaacgc gcggggagag gcggtttgcg
3481 tattgggcgc tcttccgctt cctcgctcac tgactcgctg cgctcggtcg ttcggctgcg
3541 gcgagcggta tcagctcact caaaggcggt aatacggtta tccacagaat caggggataa
3601 cgcaggaaag aacatgtgag caaaaggcca gcaaaaggcc aggaaccgta aaaaggccgc
3661 gttgctggcg tttttccata ggctccgccc ccctgacgag catcacaaaa atcgacgctc
3721 aagtcagagg tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac caggcgtttc cccctggaag
3781 ctccctcgtg cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc ggatacctgt ccgcctttct
3841 cccttcggga agcgtggcgc tttctcatag ctcacgctgt aggtatctca gttcggtgta
3901 ggtcgttcgc tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc gttcagcccg accgctgcgc
3961 cttatccggt aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga cacgacttat cgccactggc
4021 agcagccact ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta ggcggtgcta cagagttctt
4081 gaagtggtgg cctaactacg gctacactag aagaacagta tttggtatct gcgctctgct
4141 gaagccagtt accttcggaa aaagagttgg tagctcttga tccggcaaac aaaccaccgc
4201 tggtagcggt ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg cgcagaaaaa aaggatctca
4261 agaagatcct ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag tggaacgaaa actcacgtta
4321 agggattttg gtcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc tagatccttt taaattaaaa
4381 atgaagtttt aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg
4441 cttaatcagt gaggcaccta tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg
4501 actccccgtc gtgtagataa ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc
4561 aatgataccg cgagacccac gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc
4621 cggaagggcc gagcgcagaa gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa
4681 ttgttgccgg gaagctagag taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc
4741 cattgctaca ggcatcgtgg tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg
4801 ttcccaacga tcaaggcgag ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc
4861 cttcggtcct ccgatcgttg tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat
4921 ggcagcactg cataattctc ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg
4981 tgagtactca accaagtcat tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc
5041 ggcgtcaata cgggataata ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg
5101 aaaacgttct tcggggcgaa aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat
5161 gtaacccact cgtgcaccca actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg
5221 gtgagcaaaa acaggaaggc aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg
5281 ttgaatactc atactcttcc tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct
5341 catgagcgga tacatatttg aatgtattta gaaaaataaa caaatagggg ttccgcgcac
5401 atttccccga aaagtgccac ctgacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt
5461 ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc
5521 tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg
5581 gctcccttta gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta
5641 gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt
5701 ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat
5761 ctcggtctat tcttttgatt tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa
5821 tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa ttttaacaaa atattaacgc ttacaattt
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
              ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
              ③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
              ④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
              ⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
              ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
              四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。

二、转化图片