产品详情
文献和实验
相关推荐
保存条件 :-20
保质期 :2年
英文名 :NM_013240.5
库存 :100
供应商 :上海烜雅生物科技有限公司
CAS号 :/
规格 :干粉/液体
基本信息名称:pUC57s-N6AMT1人源基因质粒
别称: NM_013240.5
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主:大肠杆菌
载体用途:PCR模板
基因种属:人
基因类型: | cDNA |
---|
真核抗性:
荧光蛋白:
质粒简介
pUC57s-N6AMT1(NM_013240.5)是一个人源基因克隆质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3389 bp ds-DNA circular SYN 22-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3389
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
primer_bind 379..395
/label=M13 fwd
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
CDS 463..1107
/codon_start=1
/label=N6AMT1
/translation="MAGENFATPFHGHVGRGAFSDVYEPAEDTFLLLDALEAAAAELAG
VEICLEVGSGSGVVSAFLASMIGPQALYMCTDINPEAAACTLETARCNKVHIQPVITDL
VKGLLPRLTEKVDLLVFNPPYVVTPPQEVGSHGIEAAWAGGRNGREVMDRFFPLVPDLL
SPRGLFYLVTIKENNPEEILKIMKTKGLQGTTALSRQAGQETLSVLKFTKS"
primer_bind complement(1168..1184)
/label=M13 rev
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
rep_origin complement(1570..2158)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2329..3189)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3190..3294)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgaatt ggagatcggt acttcgcgaa
421 tgcgtcgaga attcgcacgc gcatggaacg cagcgaagga ctatggcagg ggagaacttc
481 gctacgccgt tccacgggca cgtgggccgc ggcgccttca gcgacgtgta cgagcccgcg
541 gaggacacgt ttctgctttt ggacgcgctg gaggcagcgg ctgccgaact ggcaggagtg
601 gaaatatgcc tggaagtagg gtcagggtct ggtgtagtat ctgcattcct agcctctatg
661 ataggccctc aggctttgta catgtgcact gatatcaacc ctgaggcagc agcttgtacc
721 ctagagacag cacgctgtaa caaagttcac attcaaccag ttattacaga tttggtcaaa
781 ggcttgctac caagattgac cgaaaaagtt gatcttctgg tgtttaatcc cccctatgta
841 gtgactccac ctcaagaggt aggaagtcac ggaatagagg cagcttgggc tggtggcaga
901 aatggtcggg aagtcatgga caggtttttt cccctggttc cagatctcct ttcaccaaga
961 ggattattct atttagttac cattaaagaa aacaacccag aagaaatttt gaaaataatg
1021 aagacaaaag gtctgcaagg aaccactgca ctttccagac aagcaggcca agaaactctt
1081 tcagtcctca agttcaccaa gtcttagctc gagggatgcc gggaccgacg agtgcagagg
1141 cgtgcaagcg agcttggcgt aatcatggtc atagctgttt cctgtgtgaa attgttatcc
1201 gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag tgtaaagcct ggggtgccta
1261 atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg cccgctttcc agtcgggaaa
1321 cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg gggagaggcg gtttgcgtat
1381 tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc tcggtcgttc ggctgcggcg
1441 agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc acagaatcag gggataacgc
1501 aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa aggccgcgtt
1561 gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc gacgctcaag
1621 tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag gcgtttcccc ctggaagctc
1681 cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc
1741 ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt
1801 cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc gctgcgcctt
1861 atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc cactggcagc
1921 agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag agttcttgaa
1981 gtggtggcct aactacggct acactagaag aacagtattt ggtatctgcg ctctgctgaa
2041 gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa ccaccgctgg
2101 tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag gatctcaaga
2161 agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg aacgaaaact cacgttaagg
2221 gattttggtc atgagattat caaaaaggat cttcacctag atccttttaa attaaaaatg
2281 aagttttaaa tcaatctaaa gtatatatga gtaaacttgg tctgacagtt accaatgctt
2341 aatcagtgag gcacctatct cagcgatctg tctatttcgt tcatccatag ttgcctgact
2401 ccccgtcgtg tagataacta cgatacggga gggcttacca tctggcccca gtgctgcaat
2461 gataccgcga gacccacgct caccggctcc agatttatca gcaataaacc agccagccgg
2521 aagggccgag cgcagaagtg gtcctgcaac tttatccgcc tccatccagt ctattaattg
2581 ttgccgggaa gctagagtaa gtagttcgcc agttaatagt ttgcgcaacg ttgttgccat
2641 tgctacaggc atcgtggtgt cacgctcgtc gtttggtatg gcttcattca gctccggttc
2701 ccaacgatca aggcgagtta catgatcccc catgttgtgc aaaaaagcgg ttagctcctt
2761 cggtcctccg atcgttgtca gaagtaagtt ggccgcagtg ttatcactca tggttatggc
2821 agcactgcat aattctctta ctgtcatgcc atccgtaaga tgcttttctg tgactggtga
2881 gtactcaacc aagtcattct gagaatagtg tatgcggcga ccgagttgct cttgcccggc
2941 gtcaatacgg gataataccg cgccacatag cagaacttta aaagtgctca tcattggaaa
3001 acgttcttcg gggcgaaaac tctcaaggat cttaccgctg ttgagatcca gttcgatgta
3061 acccactcgt gcacccaact gatcttcagc atcttttact ttcaccagcg tttctgggtg
3121 agcaaaaaca ggaaggcaaa atgccgcaaa aaagggaata agggcgacac ggaaatgttg
3181 aatactcata ctcttccttt ttcaatatta ttgaagcatt tatcagggtt attgtctcat
3241 gagcggatac atatttgaat gtatttagaa aaataaacaa ataggggttc cgcgcacatt
3301 tccccgaaaa gtgccacctg acgtctaaga aaccattatt atcatgacat taacctataa
3361 aaataggcgt atcacgaggc cctttcgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
P3679/pCMV-SPORT6-TRAPPC2L人源基因质粒 |
P3680/pCMV-SPORT6-CBFB人源基因质粒 |
P3681/pCMV-SPORT6-MLX(1同义突变)人源基因质粒 |
P3682/pCMV-SPORT6-GOSR2人源基因质粒 |
P3683/pCMV-SPORT6-LRRFIP1人源基因质粒 |
P3684/pCMV-SPORT6-NT5C人源基因质粒 |
P3685/pCMV-SPORT6-CENPN人源基因质粒 |
P3686/pCMV-SPORT6-ACOT13人源基因质粒 |
P3687/pCMV-SPORT6-TMEM80人源基因质粒 |
P3688/pCMV-SPORT6-MTO1(1同义突变)人源基因质粒 |
P3689/pCMV-SPORT6-TMEM231人源基因质粒 |
P3690/pCMV-SPORT6-ETV4人源基因质粒 |
上海烜雅生物科技有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:7年