pUC57s-N6AMT1人源基因质粒

pUC57s-N6AMT1人源基因质粒

价格: ¥100 - 1000

品牌:Xybio

货号:P1767

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保存条件 :-20

保质期 :2年

英文名 :NM_013240.5

库存 :100

供应商 :上海烜雅生物科技有限公司

CAS号 :/

规格 :干粉/液体

基本信息
名称:pUC57s-N6AMT1人源基因质粒
别称: NM_013240.5
复制子: pUC
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度

质粒属性
载体宿主:大肠杆菌
载体用途:PCR模板
基因种属:
基因类型: cDNA
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光蛋白:

质粒简介
       pUC57s-N6AMT1(NM_013240.5)是一个人源基因克隆质粒。
质粒图谱


质粒序列
LOCUS       Exported                3389 bp ds-DNA     circular SYN 22-DEC-2017
DEFINITION  synthetic circular DNA
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..3389
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     primer_bind     379..395
                     /label=M13 fwd
                     /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                     variants"
     CDS             463..1107
                     /codon_start=1
                     /label=N6AMT1
                     /translation="MAGENFATPFHGHVGRGAFSDVYEPAEDTFLLLDALEAAAAELAG
                     VEICLEVGSGSGVVSAFLASMIGPQALYMCTDINPEAAACTLETARCNKVHIQPVITDL
                     VKGLLPRLTEKVDLLVFNPPYVVTPPQEVGSHGIEAAWAGGRNGREVMDRFFPLVPDLL
                     SPRGLFYLVTIKENNPEEILKIMKTKGLQGTTALSRQAGQETLSVLKFTKS"
     primer_bind     complement(1168..1184)
                     /label=M13 rev
                     /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                     variants"
     rep_origin      complement(1570..2158)
                     /direction=LEFT
                     /label=ori
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"
     CDS             complement(2329..3189)
                     /codon_start=1
                     /gene="bla"
                     /product="beta-lactamase"
                     /label=AmpR
                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                     related antibiotics"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                     LIKHW"
     promoter        complement(3190..3294)
                     /gene="bla"
                     /label=AmpR promoter
ORIGIN
        1 tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc tctgacacat gcagctcccg gagacggtca
       61 cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg
      121 ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc
      181 accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc
      241 attcgccatt caggctgcgc aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat
      301 tacgccagct ggcgaaaggg ggatgtgctg caaggcgatt aagttgggta acgccagggt
      361 tttcccagtc acgacgttgt aaaacgacgg ccagtgaatt ggagatcggt acttcgcgaa
      421 tgcgtcgaga attcgcacgc gcatggaacg cagcgaagga ctatggcagg ggagaacttc
      481 gctacgccgt tccacgggca cgtgggccgc ggcgccttca gcgacgtgta cgagcccgcg
      541 gaggacacgt ttctgctttt ggacgcgctg gaggcagcgg ctgccgaact ggcaggagtg
      601 gaaatatgcc tggaagtagg gtcagggtct ggtgtagtat ctgcattcct agcctctatg
      661 ataggccctc aggctttgta catgtgcact gatatcaacc ctgaggcagc agcttgtacc
      721 ctagagacag cacgctgtaa caaagttcac attcaaccag ttattacaga tttggtcaaa
      781 ggcttgctac caagattgac cgaaaaagtt gatcttctgg tgtttaatcc cccctatgta
      841 gtgactccac ctcaagaggt aggaagtcac ggaatagagg cagcttgggc tggtggcaga
      901 aatggtcggg aagtcatgga caggtttttt cccctggttc cagatctcct ttcaccaaga
      961 ggattattct atttagttac cattaaagaa aacaacccag aagaaatttt gaaaataatg
     1021 aagacaaaag gtctgcaagg aaccactgca ctttccagac aagcaggcca agaaactctt
     1081 tcagtcctca agttcaccaa gtcttagctc gagggatgcc gggaccgacg agtgcagagg
     1141 cgtgcaagcg agcttggcgt aatcatggtc atagctgttt cctgtgtgaa attgttatcc
     1201 gctcacaatt ccacacaaca tacgagccgg aagcataaag tgtaaagcct ggggtgccta
     1261 atgagtgagc taactcacat taattgcgtt gcgctcactg cccgctttcc agtcgggaaa
     1321 cctgtcgtgc cagctgcatt aatgaatcgg ccaacgcgcg gggagaggcg gtttgcgtat
     1381 tgggcgctct tccgcttcct cgctcactga ctcgctgcgc tcggtcgttc ggctgcggcg
     1441 agcggtatca gctcactcaa aggcggtaat acggttatcc acagaatcag gggataacgc
     1501 aggaaagaac atgtgagcaa aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa aggccgcgtt
     1561 gctggcgttt ttccataggc tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc gacgctcaag
     1621 tcagaggtgg cgaaacccga caggactata aagataccag gcgtttcccc ctggaagctc
     1681 cctcgtgcgc tctcctgttc cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc
     1741 ttcgggaagc gtggcgcttt ctcatagctc acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt
     1801 cgttcgctcc aagctgggct gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc gctgcgcctt
     1861 atccggtaac tatcgtcttg agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc cactggcagc
     1921 agccactggt aacaggatta gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag agttcttgaa
     1981 gtggtggcct aactacggct acactagaag aacagtattt ggtatctgcg ctctgctgaa
     2041 gccagttacc ttcggaaaaa gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa ccaccgctgg
     2101 tagcggtggt ttttttgttt gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag gatctcaaga
     2161 agatcctttg atcttttcta cggggtctga cgctcagtgg aacgaaaact cacgttaagg
     2221 gattttggtc atgagattat caaaaaggat cttcacctag atccttttaa attaaaaatg
     2281 aagttttaaa tcaatctaaa gtatatatga gtaaacttgg tctgacagtt accaatgctt
     2341 aatcagtgag gcacctatct cagcgatctg tctatttcgt tcatccatag ttgcctgact
     2401 ccccgtcgtg tagataacta cgatacggga gggcttacca tctggcccca gtgctgcaat
     2461 gataccgcga gacccacgct caccggctcc agatttatca gcaataaacc agccagccgg
     2521 aagggccgag cgcagaagtg gtcctgcaac tttatccgcc tccatccagt ctattaattg
     2581 ttgccgggaa gctagagtaa gtagttcgcc agttaatagt ttgcgcaacg ttgttgccat
     2641 tgctacaggc atcgtggtgt cacgctcgtc gtttggtatg gcttcattca gctccggttc
     2701 ccaacgatca aggcgagtta catgatcccc catgttgtgc aaaaaagcgg ttagctcctt
     2761 cggtcctccg atcgttgtca gaagtaagtt ggccgcagtg ttatcactca tggttatggc
     2821 agcactgcat aattctctta ctgtcatgcc atccgtaaga tgcttttctg tgactggtga
     2881 gtactcaacc aagtcattct gagaatagtg tatgcggcga ccgagttgct cttgcccggc
     2941 gtcaatacgg gataataccg cgccacatag cagaacttta aaagtgctca tcattggaaa
     3001 acgttcttcg gggcgaaaac tctcaaggat cttaccgctg ttgagatcca gttcgatgta
     3061 acccactcgt gcacccaact gatcttcagc atcttttact ttcaccagcg tttctgggtg
     3121 agcaaaaaca ggaaggcaaa atgccgcaaa aaagggaata agggcgacac ggaaatgttg
     3181 aatactcata ctcttccttt ttcaatatta ttgaagcatt tatcagggtt attgtctcat
     3241 gagcggatac atatttgaat gtatttagaa aaataaacaa ataggggttc cgcgcacatt
     3301 tccccgaaaa gtgccacctg acgtctaaga aaccattatt atcatgacat taacctataa
     3361 aaataggcgt atcacgaggc cctttcgtc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
              收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
              1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
              加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
              6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
              将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
              挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
              四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
              穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

二、转化图片

P3679/pCMV-SPORT6-TRAPPC2L人源基因质粒
P3680/pCMV-SPORT6-CBFB人源基因质粒
P3681/pCMV-SPORT6-MLX(1同义突变)人源基因质粒
P3682/pCMV-SPORT6-GOSR2人源基因质粒
P3683/pCMV-SPORT6-LRRFIP1人源基因质粒
P3684/pCMV-SPORT6-NT5C人源基因质粒
P3685/pCMV-SPORT6-CENPN人源基因质粒
P3686/pCMV-SPORT6-ACOT13人源基因质粒
P3687/pCMV-SPORT6-TMEM80人源基因质粒
P3688/pCMV-SPORT6-MTO1(1同义突变)人源基因质粒
P3689/pCMV-SPORT6-TMEM231人源基因质粒
P3690/pCMV-SPORT6-ETV4人源基因质粒

 

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