提供商 ：江苏集萃药康生物科技股份有限公司

服务名称 ： B6/JGpt-Apoeem1Cd82/Gpt

Apoe

品系名称： B6/JGpt-Apoeem1Cd82/Gpt

品系类型：Cas9-KO

品系编号： T001458

背景： C57BL/6JGpt

 

品系描述

APOE（apolipoprotein E）是载脂蛋白 E，一种脂肪结合蛋白（载脂蛋白），乳糜微粒和中密度脂蛋白（IDLs）的一部分。APOE 主要负责运输脂蛋白、脂溶性维生素及胆固醇。外周组织中，APOE 主要由肝脏和巨噬细胞产生，并介导胆固醇代谢。中枢神经系统中， APOE 主要由星形胶质细胞产生，通过 APOE 受体将胆固醇转运到神经元。此外 APOE 是大脑中的主要胆固醇载体^[1]。

大量文献表明，APOE 完全缺失的小鼠血浆中的乳糜微滴、VLDL 及 LDL 清除能力会受损，胆固醇含量会显著升高^[2]。Apoe 基因剔除小鼠对胆固醇极敏感，胆固醇进入血浆后发生累积，约 3 月龄时即在靠近主动脉处出现脂肪纹，并随着年龄增长而加剧，形成动脉粥样硬化前期病变。年老的 Apoe 基因剔除小鼠（大于 17 个月）脑内将出现由晶状胆固醇裂隙、脂滴及泡沫细胞组成的黄瘤病灶，在脉络丛和腹侧穹中可见较小的黄瘤。研究还发现Apoe 基因剔除小鼠的学习记忆能力出现障碍^[2]。

集萃药康采用基因编辑技术将 C57BL/6 小鼠 Apoe 基因敲除，建立 Apoe 敲除小鼠模型。该品系不表达 APOE 蛋白，血脂浓度显著升高，饲喂高脂饲料会发生早期动脉粥样硬化， 可用于心血管疾病及阿尔兹海默症的研究。

 

应用领域

1. 心血管疾病研究：动脉粥样硬化、高胆固醇血症、高血脂症

2. 脂代谢研究

3. 神经生物学研究：阿尔兹海默症、行为及学习障碍、神经退行性疾病

 

品系优势

1. AAALAC-国际认证的动物设施

2. 基于IMPC表型分析平台的完善功能分析

3. 遗传稳定，每年定期SNP鉴定

 

品系鉴定

1. 鉴定周龄：3-4W

2. 基因型：KO/KO，纯合体

3. 基因位点：Apoe

4. 鉴定方案：见附件1

验证数据

 

1. 体重监测

图1   Apoe小鼠体重水平检测。野生鼠和Apoe小鼠在正常饮食（A&B）和高脂饮食（C&D）下体重水平检测。Apoe小鼠组与野生型组体重变化趋势相似，无显著差异。

 

 

1. 血脂监测

 

图2 Apoe小鼠10周龄血脂检测。小鼠4周龄开始给予不同饮食，与野生鼠相比，在正常饮食或高脂饮食6周后，Apoe小鼠血液中TC含量及LDL-c含量均显著升高（P≤0.0001）。TC：TotalCholesterol，总胆固醇；TG：Triglyceride，甘油三酯；HDL-c：High-densitylipoproteincholesterol，高密度脂蛋白；LDL-c：LowDensityLipoprotein，低密度脂蛋白。

 

1. 主动脉弓油红O 染色

图3Apoe 小鼠主动脉弓油红O染色。小鼠4周龄开始给予不同饮食，诱导6周到16周后，选取野生鼠组和Apoe模型鼠组中40%高脂饮食的雄性血脂最高的小鼠，分离主动脉弓通过油红O染色观察主动脉壁。

结果显示：Apoe 小鼠20周龄雄鼠主动脉内壁开始出现局部管壁增厚，增厚部分，提示出现脂质附着，此为动脉粥样硬化初期的表型。

结果表明：40%高脂喂食能够诱导Apoe小鼠动脉粥样硬化，并于诱导16周时出现明显早期动脉粥样硬化征兆。

 

 

繁育保种

 

1. 饲料：普通饲料（4 脂肪含量）

2. 鉴定方式：繁殖笼种鼠采用耳缘打孔法标记，剪尾鉴定，库存无需鉴定

3. 配繁方式：纯合配纯合

4. 配繁注意： 雌鼠需检查双阴道

5. 产仔代乳情况：产仔好代乳好

生化指标

1. 血常规

Parameter	Units	Males	Females
Hematology
Age	weeks	16	16
WBC	K/uL	4.76	4.14
RBC	M/uL	10.17	9.78

 

Hb	g/L	146.26	141.17
HCT	%	42.13	40.83
MCV	fL	41.46	41.77
MCH	Pg	14.39	14.44
MCHC	g/L	347.17	345.83
RDW	%	18.61	18.19
PLT	K/uL	954.48	767.83
MPV	fL	4.20	4.16
NE#	K/uL	0.71	0.78
NE%	%	14.57	19.01
LY#	K/uL	3.88	3.18
LY%	%	81.74	76.76
EO#	K/uL	0.01	0.01
EO%	%	0.17	0.15
MO#	K/uL	0.17	0.17
MO%	%	3.46	4.02
BA#	K/uL	0.00	0.00
BA%	%	0.06	0.06

 

1. 血生化

 

Parameter	Units	Males	Females
Biochemistry
Age	weeks	16	16
ALT	IU/L	32.48	25.00
AST	IU/L	72.90	71.21
TP	g/dL	6.11	5.32
ALB	g/dL	3.80	3.70
AKP	IU/L	143.14	237.75
TBIL	umol/L	1.63	1.93
BUN	mmol/L	9.09	8.80
CREA	umol/L	13.90	12.75
CHOl	mmol/L	17.69	16.03
TG	mmol/L	1.27	0.54
HDL-C	mmol/L	2.46	2.20
LDL-C	mmol/L	16.49	14.74
Ca	mmol/L	2.63	2.47
P	mmol/L	3.85	3.23
Fe	umol/L	17.29	17.51
GLU	mmol/L	6.20	5.59

注意事项：

1. 小鼠饲料

Apoe^-/-小鼠在日常喂养饲料方面需要重视其质量，模型饲料中脂肪类型和含量以及胆固醇的水平对于动物机能和研究结果的可靠性和可重复性非常关键。目前集萃药康日常喂养的饲料为江苏协同SPF级饲料，4%脂肪含量。

1. 动脉粥样硬化模型Apoe^-/-与Ldlr^-/-的区别

研究动脉粥样硬化最合适的动物模型为Apoe^-/-。

Apoe^-/-为自发的动脉粥样硬化模型，与人的动脉粥样硬化进程更为相似。Apoe^-/-小鼠的血浆总胆固醇水平比正常小鼠高，并且总胆固醇水平不随性别与年龄而改变。3月龄可在临近大动脉附近发现脂肪纹，病变随着年龄的增加而增大，发展病程中脂质少但细长细胞增多，典型的动脉粥样硬化病变前期的表现。在13月龄，小鼠的动脉粥样硬化病变从颈动脉、心脏和主动脉扩展到肾动脉和髂分叉。

主动脉弓油红O染色：

Ldlr-/-只有在高胆固醇饲料喂养下才会出现动脉粥样硬化斑块，普通饲料无法诱导斑块的出现。高胆固醇饲料喂养16周后：小鼠出现主动脉广泛的内膜增厚及60%-80%表面苏丹染色阳性，动脉粥样硬化病变处出现内皮破裂，巨噬细胞及泡沫细胞聚集。

相关产品

T001464LDLR

发表文献

1. W Tong, Y Duan, R Yang. et al. Foam Cell-Derived CXCL14 Muti-Functionally Promotes Atherogenesis and Is a Potent Therapeutic Target in Atherosclerosis. Journal of Cardiovascular Translational Research. 2020, Apr; 13(2): 215-224. DOI: 10. 1007/s12265-019-09915-z. 【APOE. T001458】

2. S Xu, H Ni, H Chen, Q Dai. et al. The interaction between STAT3 and nAChRα1 interferes with nicotine-induced atherosclerosis via Akt/mTOR signaling cascade. Aging (Albany NY) . 2019 Oct 14; 11(19): 8120-8138. DOI: 10. 18632/aging. 102296. 【APOE. T001458】

3. G Miao, X Zhao, B Wang, L Zhang. et al. TLR2/CXCR4 coassociation facilitates Chlamydia pneumoniae infection-induced atherosclerosis. Heart and circulatory physiology. 2020, Jun 1; 318(6): H1420-H1435. DOI: 10. 1152/ajpheart. 00011. 2020. 【APOE. T001458. Tlr2-KO.T006733】

4. H Ni, S Xu, H Chen, Q Dai. et al. Nicotine modulates CTSS (Cathepsin S) synthesis and secretion through regulating the autophagy-lysosomal machinery in atherosclerosis. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2020, Sep; 40(9): 2054-2069. DOI: 10. 1161/ATVBAHA. 120. 314053. 【APOE. T001458】

5. Y Wang, Q Jia, Y Zhang, J Wei, P Liu. et al. Taoren Honghua Drug attenuates atherosclerosis and plays an anti-inflammatory role in APOE knock-out mice and RAW264. 7 cells. Frontiers in Pharmacology. 2020, Jul 17; 11:1070. DOI: 10. 3389/fphar. 2020. 01070. 【APOE. T001458】

6. W Bian, X Jing, Z YangvDownregulation of LncRNA NORAD promotes Ox-LDL-induced vascular endothelial cell injury and atherosclerosis. Aging (Albany NY). 2020, Apr 8; 12(7): 6385-6400. DOI: 10. 18632/aging. 103034. 【APOE. T001458】

7. Y Wang, Q Jia, Y Zhang, J Wei, P Liu. et al. Amygdalin attenuates atherosclerosis and plays an anti-inflammatory role in APOE knock-out mice and bone marrow-derived macrophages. Front Pharmacol. 2020, Oct 29; 11:590929. DOI: 10. 3389/fphar. 2020. 590929. 【APOE. T001458】

8. S Xu, H Chen, H Ni, Q Dai. et al. Targeting HDAC6 attenuates nicotine-induced macrophage pyroptosis via NF-κB/NLRP3 pathway. Atherosclerosis. 2021 ; 317:1-9. DOI: 10. 1016/j. atherosclerosis. 2020. 11. 021. 【APOE. T001458】

9. HX Zhang, CS Zhang, RZ Huang. et al. Oral administration of MnCl2 attenuated hyperlipidemia-related cardiac remodeling in APOE^−/− mice. Journal of Pharmacological Sciences. 2021 Feb; 145(2): 167-174. DOI: 10. 1016/j. jphs. 2020. 11. 010. 【APOE. T001458】

10. Zeng P, Yang J, Liu L, Yang X, Yao Z, Ma C, Zhu H, Su J, Zhao Q, Feng K, Yang S, Zhu Y, Li X, Wang W, Duan Y, Han J, Chen Y. ERK1/2 inhibition reduces vascular calcification by activating miR-126-3p-DKK1/LRP6 pathway. Theranostics. 2021 Jan 1; 11(3): 1129-1146. DOI: 10.7150/thno.49771.【ApoE deficient (apoE^-/-). T001458】

 

参考文献

 

1. Piedrahita, Jorge A., et al. "Generation of mice carrying a mutant apolipoprotein E gene inactivated by gene targeting in embryonic stem cells." Proceedings of the National Academy of Sciences 89.10 (1992): 4471-4475.

2. MOGHADASIAN, MOHAMMED H., et al. "Pathophysiology of apolipoprotein E deficiency in mice: relevance to apo E-related disorders in humans." The FASEB Journal 15.14 (2001): 2623-2630.